谁给我讲讲conditional knockout技术好在哪？

echowdk

paper上一直在说，利用conditional knockout mouse可以在不同时间，不同组织器官观察或分析某一个基因的功能。在不同组织器官里观察还能想得通怎么做，但在不同时间观察我真不知道怎么做这个实验，谁能帮忙解释一下啊，先谢过了。

chutu

你可以在需要的时间给予诱导剂，诱导基因敲除呀

echowdk

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+ t; D. d5 A4 m/ Y7 D/ ?那就是说我在设计载体的时候，就得把这个诱导元件加上了是吗？

goodboy

是这样的，诱导元件在加入诱导剂后表达

echowdk

回复 goodboy 的帖子9 P6 C7 X& F- B$ v
1 Y) `, O% {+ ?$ J9 t6 J8 ]1 h+ W
哦，酱紫啊。谢谢。

w343989328

在特定组织表达的蛋白启动子后添加，比如说Cre酶，使得Cre酶在目的组织中表达诱导loxP位点的重组。。另外还可以建立标记跟踪系统，比如MARCM、MADM系统

mansnoopy

conditional knockout mouse可以在不同时间，不同组织器官.  首先不同组织器官：一般来讲构建c-KO模型用的是cre-loxp系统 和flp-frt这两个系统。如，利用工具鼠vasa-cre。与flox的小鼠交配，就可以特异的敲掉生殖系统的基因，因为vasa在生殖细胞特异表达。其次时间的可控制性，vasa在胚胎十几天时开始表达，所以cre的活性也在此时启动，达到时间的可控制性

wdx0502

在构建好的两个转基因小鼠后，条件性基因敲除比较容易实现。所需要进行的最后一步操作就是让这两种转基因小鼠进行交配。所产生的子代小鼠同时具有Cre的外源表达基因和经过loxP修饰的目的基因，根据Cre表达的时空特异性就可以实现目的基因在特定组织中、特定发育阶段发生预期的改变。

mansnoopy

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* U7 D' J: U9 K% Z8 i6 C; [# _) q8 o8 N' `2 y( [; K3 g
再补充说明一下，除了cre-loxp系统外，flp-frt也是很长用的系统，原理是一样的

echowdk

讲得都好官方。。。