新手ips培养18天形态请教

jane2011

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& L3 q  p% ?) w7 L非常感谢，学习了，那这种不完全诱导的细胞是否有干性呢？

jefferson

jane2011 发表于 2011-11-14 12:11 : a/ D+ p5 b/ }* w. Z: _+ R& g
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; L/ X" |* d. W$ ~* D: w* g7 O非常感谢，学习了，那这种不完全诱导的细胞是否有干性呢？

! N4 j+ p7 K* L7 |7 o这种不完全诱导的细胞是没有多潜能性的，只是增殖能力和细胞形态等方面与起始细胞有差别．# I- `$ O! x6 S" b$ J

# [0 g  s( g* X6 m' T据我们观察，这种不完全诱导的细胞也有不同的阶段，有的只是形态有些改变，有的增殖能力明显增强，有的甚至可以呈现克隆状生长．免疫荧光染色后，这种呈现克隆状生长的不完全诱导细胞有的会有很弱的阳性信号．但是其不能形成ＥＢ，不具有多潜能性．

song58

我觉得吧，要是用HFF诱导iPS的话，最好不要超过6代，我试过P7和P8的HFF，感觉病毒很难进去，诱导周期很长，靶细胞后来全长疵了。
! C* m: U6 J' N+ |MEF的话，我建议最好不用3代以后的。

song58

请教jefferson兄：这种细胞你们IF染的啥呀？我染过AP，这样的细胞群落（用克隆我觉得可能不严谨）绝大部分都是AP阴性，只有偶尔几个尤其是看着像脂肪细胞群的能染上AP

jane2011

我用的是P3代的HFF, MEF是P2代的，但当时没算好时间，feeder准备的晚了两天，所以本来该在day6时铺到feeder上，但我的HFF是day8时才种到feeder上的，不知这是否是没得到克隆的原因。:(

细胞海洋

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( v: T" s$ X$ z# C4 y
+ r# r% `5 N* r1 H/ }像我这样 点击他帖子中回复按钮 要不然他看不到你问他的

274996064

我觉得你的那个不是iPS克隆，首先iPS克隆会有明显的细胞界限，折光性特别的好。另外你的细胞克隆也不是特别的典型，细胞没有聚集的特别的好。* Y( b  W* |" e
我认为就是多层细胞的叠加。

huangcong1988

这个应该不是ips colony吧？ ips集落应该界限清晰，而且很聚集，您的这个很分散，而且边缘很模糊，您可以试试先用AKP染色简单鉴定一下，看其是否是AKP阳性，这样或许能进行一个初步判定

song58

回复 jefferson 的帖子* }: w, v# O% M. f
1 [' c- |0 ^6 f- G  U6 S
请教jefferson兄：这种细胞你们IF染的啥呀？我染过AP，这样的细胞群落（用克隆我觉得可能不严谨）绝大部分都是AP阴性，只有偶尔几个尤其是看着像脂肪细胞群的能染上AP

ilovelife

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9 D$ y5 U8 n2 ~! ]很详尽，很清晰，对我这样的新手很有帮助。谢谢