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二、关于胚胎干细胞、iPS细胞特性会议发言：' h) j. G- ~. E$ E
1.周 琪，中科院动物所研究员 / \& ~4 p. M5 o
题目：iPS细胞发育潜能及安全性评价* i9 u* z3 T# h9 C; T+ p/ P
（1）开场白继续回忆几年前听干细胞报告人如何少，现在的听众如何多（听过周琪多次报告，几乎每次都提到此事）。提到973首席今天基本都参会。+ X* [- I! W" T0 X3 Y
（2）发育潜能的评价指标：核型的检测，体外传代能力、体外分化能力，体内传代能力，形成嵌合体能力，四倍体补偿能力等。通过四倍体补偿回答了iPS多潜能性问题。; Z! T- w3 W; ~
(3)对iPS致瘤性的研究几乎都是来自于嵌合体。继续回忆“小小”鼠的工作。( |0 S& k( {! b: S7 Y1 a& f1 b4 Y) E
（4）IPS来源的动物发现肿瘤的发生，而这些肿瘤都可以检测到外因子的表达。这些外因子的插入可能是肿瘤发生的元凶。
6 b- r& \, [$ ]（5）检测几种不同方法得到的ipS，如C-Myc free，Oct4单一诱导的IPS，研究发育的比较。是什么决定这些不同来源细胞的发育功能目前不清楚。
9 J, y. I; b2 K0 _/ L/ n（6）向神经干细胞转分化的工作，评价其安全性。
' j1 d a2 W4 i6 P" y! P# Q（7）介绍去年发表在JBC关于miRNA的工作。. G$ g B- t2 {7 Y' ?" X* j
. P# [5 e2 f5 E7 ^" V: |, y4 H2.裴端卿，中科院广州生物医药与健康研究院研究员
8 ?( e( @) K0 s& U* N- W5 A题目： Reprogramming: A look at Vitamin C
- Y* \+ X/ F% m- `. c/ x（1）回忆过去10年所做的工作，研究Oct4调控ESC的网络，转录因子间作用等。非选择性iPS诱导系统。+ O1 v. [5 M7 f7 I
（2）与张毅等实验室合作，发现维生素C通过组蛋白修饰增加体细胞重编程，通过减少H3K36me2/3水平影响重编程。文章近期将发表在Cell Stem Cell。* q& w! w) ~8 Q9 e7 q+ C1 Y
（3）维生素C通过影响Jhdm1a/1b基因发挥其作用。
9 A- p( w/ | J+ m4 h5 K（4）用单因子Oct4可使细胞重编程，3个实验室：丁盛、邓宏魁和裴端卿同时发现这个现象。但效率很低，改变H3K36me2/3后可增强单因子Oct4重编程的效率。
7 N) \& Z) }1 Q9 Y" @1 K3 H( D
( S3 n$ j5 b4 `0 H! E, I4 I" j2 [4 O3.高绍荣，北京生命科学研究所研究员
( B: T7 w, y! I: T题目：IPS：Molecular Mechanism and potential application* B& @. h+ g/ L8 Z! m
（1）理解IPS多能性和机制方面的工作。介绍四倍体补偿实验。使用的是inducable vector进行iPS制备。使用小鼠脂肪细胞进行reprogramming，获得的iPS进行四倍体补偿实验。四倍体补偿获得的小鼠的脂肪细胞（或者血细胞）再制备iPS，然后再进行四倍体补偿，连续进行了6代，以证明iPS的全能性。 1 P& t, }6 V2 L3 M+ }" \
(2)使用RNASeq、miRNA-Seq、ChIP-Seq H3K27、DNA methylation-Seq等方法，分析不同代次、不同来源的iPS，以研究其DNA甲基化等表型的差异性。( i( ~" C/ V5 s; j6 ?- t9 L3 {
(3) 介绍用iPS治疗疾病方面的工作。以beta地中海贫血（阴性遗传单基因疾病）为疾病模型。% J. t6 y/ m; r7 G
(4)使用同源重组方法更正iPS细胞的突变基因。比较更正前后基因表达谱的差异。分化iPS向造血细胞分化。证明基因打靶可以修复某些遗传病。, @: ^ h+ w* H' k1 X
* l( p+ E9 Q' K2 m2 P l* e
4.邓宏魁，北京大学生命科学院教授
- P8 p _. g8 U7 A2 Q2 w题目：建立多潜能干细胞以及向胰岛分泌细胞的定向诱导分化: F5 G2 H+ J, g4 L, C- b
（1）建立iPS时，使用CMV启动子drive EGFP，若局部区域无GFP表达，提示该部位细胞发生重编程，因为CMV在ESC中沉默，不能驱动GFP表达。
( f3 L- G* E7 X3 W（2）建立一个新的人iPS基因组合：Oct4、Sox2、Klf4、UTF1，后者是新的重编程因子。发现P53是体细胞重编程的主要障碍。# I0 K) |; V2 O+ b0 |. v0 v
（3）小分子化合物筛选导致重编程的分子，包括组蛋白去甲基化抑制剂、组蛋白乙酰化抑制剂等。同时抑制重编程的主要障碍因素能增加重编程效率。
: T, [2 U e2 o/ v$ \, O6 n$ D（4）建立单基因Oct4诱导重编程体系（Tet-On Oct4）。建立新的vector free和高效的重编程体系。4 P+ W* a2 ^7 t
（5）诱导ES向胰岛细胞定向分化。建立大动物猴子iPS和疾病模型，进行糖尿病大动物实验。9 f; `4 a* V( i4 Y8 G
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5.金 颖，中科院上海生科院/上海交通大学医学院健康科学研究所研究员 / P: i# @4 Y/ c$ y; F1 x, f' i$ Q
题目：转录因子Oct4蛋白质泛素化修饰与多能干细胞分化和体细胞去分化。
- n# q" @: h" T! b$ N8 m: h（1）过去10年一直研究与Oct4相互作用的蛋白质和它所调节的靶基因。Wwp2蛋白泛素化酶，能泛素化Oct4，也抑制Oct4转录调控（2004年发表在JBC）。
* J$ e3 J: E2 t（2）Oct4也被SUMO-1修饰。
' P+ p3 r0 \! H7 T! S5 y2 q0 d（3）研究Oct4被泛素化修饰后的作用和结果。* X Y6 q7 v5 H
（注：金颖老师此次终于没再继续讲“如何建立人的ES细胞系”。）
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" O* h9 p3 L7 ]- w) R. B8 j6.肖 磊，浙江大学动物科技学院教授 a; _& b0 O/ q' K
题目：ES/iPS细胞和转基因动物研究
* U+ O5 r0 i. q% B（1）建立猪iPS和利用猪iPS建立转基因动物模型。
1 c* G& B9 j7 F- _8 ^# E（2）介绍小鼠Knock-out过程。因某些动物无ES细胞，无无法进行基因打靶工作。介绍建立大鼠iPS工作（已发表在Cell Stemcell）。
& q# D' N0 O" e6 o) r1 R（3）使用可诱导性vector建立猪iPS，并进行鉴定。使用猪iPS制备嵌合体猪需时间较长，故使用核移植方法建立。. K. I- {( U9 W7 A; R! q7 g
（4）全国多个实验室建立“猪的联盟”，共同研究猪。已获得嵌合体猪。7 M/ }5 n2 [% t7 e {
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7.卢光琇 湖南医科大学人类干细胞国家工程中心题目：各种遗传性疾病的干细胞建库向血小板诱导分化
. W7 n: G" ?+ D3 {1 y（1）已建立285个人ESC细胞系，是世界上最大ESC提供种子细胞库。每年进行试管婴儿1.3万，今年进行了1.8万。+ |8 H' w; g% o4 h u* R( c* @, \! M
（2）与骨髓库相匹配，有600个ESC可满足湖南7000万人口需要。
' T0 F- ^: \9 s& _（3）使用iPS细胞进行遗传病研究，重点是血小板无力症。- @' ]1 r6 q( d
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发表于 2011-11-15 10:02
发表于 2011-11-15 11:23
