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本帖最后由 hnsdlgl 于 2011-11-17 09:20 编辑 2 A' B' s# Z5 Z2 Z, R8 l
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情况是：这是用脐带做的组织块培养，第一天铺完组织块后（当时组织块上附着的有培养液），因为一些原因没及时加液，6天后才加的培养液10ML，到现在是15天时间过去，细胞是长出来了，但是形态不是很好，有点像帖子上说的“核溃散”，不知道是个啥情况。我的问题：
+ a0 M3 @1 L( j9 ^1.如果是间充质的话，但是传代后细胞为什么不贴壁。
6 {# I0 r5 D$ R% s1 _( X2.如果不是MSC，那是什么细胞？
) a0 e7 @4 U/ s9 T) w& a- d3.是不是老化了？一些细胞形态变化很大！"
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根据你的实验过程描述，我有一个问题：你第6天加培养液之前，培养瓶是否已有部分干了？加培养液时，用的什么血清，浓度是多少？
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你的细胞形态是MSC，但是如果消化后传代，那就大部分不是MSC了，而是MSC碎片，因此也就回答了你前面两个问题。
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! W* {8 M7 a V其实，你对问题的分析也基本正确，这种情况可以说是细胞出现了老化，更是受伤的表现。
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细胞培养过程中，培养基至少给细胞生长提供了三个方面的作用：% s/ X( ?- L7 s- I! v
1. 合适的pH、渗透压，以及某些营养条件
3 ^6 b7 I( h0 C7 ]$ u. x2. 一个比较稳定的代谢交换体系：活的细胞都要代谢，代谢产生的垃圾直接排入培养液，因此，我们隔一段时间就要换液，主要是保持培养液的新鲜，不然自身产生的垃圾直接伤害自己；或通过改变pH、渗透压等间接伤害自己。: E! e$ C5 R# e3 P- _( [
3. 屏蔽高浓度的氧损伤：氧在溶液中的溶解度比大气中的低得多，从而达到一定的较少氧损伤的作用。7 w2 a( ^0 V) y" s
: E/ x _1 @9 S R' N( k, {! X同时，细胞培养过程中，血清主要的作用时两个：
! I+ ?" Y3 q9 C( [1. 提供充足的营养
0 h, w; b$ Q1 N3 t' L8 l( E2. 提供细胞生长所需的生长因子 h/ a! a+ A: P$ ]6 [
以上两点，也是为何我推荐使用进口血清的原因，四季青的血清看上去就很稀薄、清亮，其营养没有那么充足，生长因子几乎缺乏。只有运气好的时候，偶尔可能碰到一两批可能可以用来培养MSC。
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8 u) ?, s- _. x E1 n$ c你换液时间太长，细胞可以因为生存条件恶化而受伤，而可能因为营养缺乏而老化，所以出现你所述结果。
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【个人观点，仅供参考】 |
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发表于 2011-11-16 19:30
发表于 2011-11-16 23:51
。还有可能是加了抗生素，有一定污染。