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本帖最后由 hnsdlgl 于 2011-11-17 09:20 编辑
( v& P. D9 |$ h
$ D' |1 H8 |0 q7 }# u! f; ?情况是：这是用脐带做的组织块培养，第一天铺完组织块后（当时组织块上附着的有培养液），因为一些原因没及时加液，6天后才加的培养液10ML，到现在是15天时间过去，细胞是长出来了，但是形态不是很好，有点像帖子上说的“核溃散”，不知道是个啥情况。我的问题：
1 O2 h) I8 Y- q4 N7 M( S5 N3 U1.如果是间充质的话，但是传代后细胞为什么不贴壁。 }; M7 }; x) _. Z3 p
2.如果不是MSC，那是什么细胞？
# n) e5 u$ Z& s2 B3.是不是老化了？一些细胞形态变化很大！"
! u5 y5 T4 ]) f/ Z/ Q; n& H
1 {; r( B: W9 D& r. A& f根据你的实验过程描述，我有一个问题：你第6天加培养液之前，培养瓶是否已有部分干了？加培养液时，用的什么血清，浓度是多少？# G* t# e: \4 d! G0 e
3 A# v7 G* D# {; E1 x你的细胞形态是MSC，但是如果消化后传代，那就大部分不是MSC了，而是MSC碎片，因此也就回答了你前面两个问题。) }. [0 [7 E; A; E
. E& M# y) n- i* s4 U3 K" l: G1 X其实，你对问题的分析也基本正确，这种情况可以说是细胞出现了老化，更是受伤的表现。
3 K' M# |5 I% w+ E* s9 g0 j! w3 m$ n7 r$ Z0 Y$ V! k
细胞培养过程中，培养基至少给细胞生长提供了三个方面的作用：, ], k6 x) A0 ^! G. q9 r
1. 合适的pH、渗透压，以及某些营养条件; U, G T% p/ N( u* P
2. 一个比较稳定的代谢交换体系：活的细胞都要代谢，代谢产生的垃圾直接排入培养液，因此，我们隔一段时间就要换液，主要是保持培养液的新鲜，不然自身产生的垃圾直接伤害自己；或通过改变pH、渗透压等间接伤害自己。
) u# h: J; L$ z- j8 p. z3. 屏蔽高浓度的氧损伤：氧在溶液中的溶解度比大气中的低得多，从而达到一定的较少氧损伤的作用。
% V( h- J. c/ [ m! ^! R" r2 P1 Y b8 H5 Y# q7 {4 x
同时，细胞培养过程中，血清主要的作用时两个：6 N6 X4 G* J! `# a0 H- r V o0 V
1. 提供充足的营养0 D! ?! ]% O: g' Z/ }
2. 提供细胞生长所需的生长因子
( N0 _4 F% E1 q$ A& _+ C8 m以上两点，也是为何我推荐使用进口血清的原因，四季青的血清看上去就很稀薄、清亮，其营养没有那么充足，生长因子几乎缺乏。只有运气好的时候，偶尔可能碰到一两批可能可以用来培养MSC。2 s, o# a$ {, q# u( ?% ?! T3 f
+ q L* a' Y, K, U你换液时间太长，细胞可以因为生存条件恶化而受伤，而可能因为营养缺乏而老化，所以出现你所述结果。
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【个人观点，仅供参考】 |
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发表于 2011-11-16 19:30
发表于 2011-11-16 23:51
。还有可能是加了抗生素，有一定污染。