培养PBMC细胞与CIK扩增培养有什么需要注意的？

生物技术小子

请教一下，小弟之前第一次做完分血的整个过程，获得的PBMC有一半是用来做CIK扩增培养，一半就这么在培养箱里养着 ，我知道就这样养着细胞会逐渐的死亡，所以也添加了OK-T3跟IL-2，来维持PBMC的生长，PBMC和CIK都是用来做杀伤7402实验，因为是第一次养PBMC跟做CIK细胞扩增培养，所以有些细节不清楚导致接下来的实验停滞不前，因此在这恳求各位大神的指导，怎样才能很好的培养好这2种细胞，做杀伤实验应该注意哪些地方，好让小弟快快把实验做完，顺利毕业...先谢谢各位了

我是丁香

你把剩下PBMC冻存起来，你如果加了其他成分，就不是PBMC了。养CIK也比较简单，关键是分离PBMC、添加因子的品牌与量、扩瓶的时机等等，养多了就熟悉了。

生物技术小子

回复 我是丁香 的帖子: D1 g$ _. ?' A

% @8 V9 X- ~. Q, H恩，好的 ，谢谢版主

lunyuyuanxj

培养时有四种经典的因子（IL-2,IL-1a,IFN-r,CD-3单抗），细胞数量足够（大于106/ml),先诱导两到三天，再视细胞数量和培养基消耗程度加入含IL-2，培养基就可以顺利养成功了，