成年小鼠成纤维细胞培养

超级小葵

新手。现在在做成年小鼠尾尖的成纤维细胞培养，今天是第8天，剪碎后用15%FBS的DMEM培养基培养，到第4天的时候长出来这些东西，跟文献网络上描述的成纤维细胞形态不一样，想请教高手看一下，这是什么细胞！非常感谢。

yanjie11678

应该不是细胞，成体组织块培养细胞应该不会这么快迁出。看你照的照片这些东西和组织块好像不在一个面上啊。

超级小葵

回复 yanjie11678 的帖子  Q/ H4 i- K, k7 J$ f

7 V" _2 m' v) d5 k4 x8 A错了，这图是第六天照的，如果这不是细胞，那是什么呢？为什么说组织和细胞不在一个面上，组织本来剪的不是很小

jhu132llh

1.细胞形态不对，请确定焦距没问题，有点疑似对焦不在细胞层面的问题+ Y( k' ^. O# H4 k0 O: _5 K( Q
2.成纤维细胞将会在3天内大量游离，3天左右将会生长到汇合度50-70%，尤其是组织块周围将会及其密集。: Y; T2 P9 |! o' z! z
3.组织培养在培养前期（前2天）请小心少动，过多移动组织皿将影响组织块的贴壁，组织块的贴壁情况直接影响细胞游离生长。

song58

话说怎么感觉有点点像keratinocyte ...

yanjie11678

其它组织块周围也有这样的东西吗？是不是你照相时调焦距的问题？我看组织块的边缘很模糊，怀疑这些东西不在细胞层面上。

超级小葵

jhu132llh 发表于 2011-11-16 16:59 ' W% L0 D- Y) m. }7 D
1.细胞形态不对，请确定焦距没问题，有点疑似对焦不在细胞层面的问题
) |5 ^5 _, I) B" [  R% `8 y2.成纤维细胞将会在3天内大量游离，3 ...

9 ^# c8 N9 R: z! I: O% i5 y
我的培养方法应该没问题吧
# Y7 w. M6 e+ [- N小鼠尾尖，剪碎后，在培养箱放半个小时左右，让其贴壁，然后加入培养基（15%FBS+DMEM+1%双抗）. z( S4 t7 W1 x! t3 u$ t4 D
我每天都拿出来观察，组织贴壁不是太牢

超级小葵

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- M% d# G/ J3 u- _7 K2 `
7 @* G  |( ^* G+ H- T5 N8 M难道不是因为组织块比较大的原因吗？

超级小葵

:'(生气啊

jhu132llh

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  y9 k0 w5 ~7 k- f8 O5 w
  n, y1 M+ M1 o掏老窝子技巧，个人尝试好多方法后总结出来的，你可以试试
- O/ A* ^4 s" l; k( O* N' `1.可以这样，先加一点培养基，在培养皿中晃一晃让培养液均匀铺在皿底，然后加入组织块，培养1 P- ?8 Q' h7 }1 z7 [4 n8 y
2.6-8小时后沿边缘极其缓慢加入剩余培养液
8 q/ R1 a# z; U3.2天不动它
" A, o( o+ [/ ~. A5 r- l4.这个是总我结了很久的较难培养的组织培养的组织培养技巧，大部分的难培养的组织培养都高效，希望对你有效