脐血间充质干细胞分离过程中用3%明胶有时候红细胞不沉降

仁心-妙术

脐血间充质干细胞分离过程中用3%明胶有时候红细胞不沉降，有时候可以沉降的很清晰（条件相同）？请问是什么原因

大少爷

①取抗凝静脉血加入等量3%明胶盐水溶液中，混匀或用3份血液与1份3%明胶溶液混匀；
3 ^! X9 l0 Q, K8 |②将试管直立静置室温或37℃温箱中30-60min,利用明胶与红细胞的粘合作用，促使红细胞快速下沉，而白细胞留在明胶溶液中；
# b4 q8 {  n/ D; K5 w, w# y8 M# Y6 Q③用毛细吸管吸取富含白细胞的上层液，移入另一试管中。
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仁心-妙术

非常感谢大少爷 的回复   还有2个问题 抗凝血与3%明胶体积比1:1-3:1之间都能分离出来？您分离的时候抗凝血有没有稀释过？

小公

回复 大少爷 的帖子5 G* |8 L6 u) V1 g9 H& Q
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你好，提取脐血间充质干细胞2个月了，没有进展，我是用羟乙基淀粉先沉降红细胞，然后ficoll分离液分离，白膜层不明显，种瓶后贴壁细胞逐渐老化，而且杂细胞很多，看到你方法，先直接离心全血去上清（1880 g，离心力是否是太大了？？），想试试，麻烦指点下，

Ivan0108

我也是做用羟乙基淀粉沉降红细胞，然后ficoll分离液分离，白膜层挺多的啊。我的问题就是接种后，细胞老是不贴壁，所以每次试验失败。现在换了各种培养皿，培养板  加了纤连蛋白在试验

ych123

回复 小公 的帖子# c3 k0 c% P! t* m0 c5 g& G

6 M0 F5 B6 m8 j8 b5 T你换新方法后养出来了吗