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[请教] 关于凝胶层析的问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-11-29 11:49 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本人新手,请教一个有关凝胶层析的问题。根据凝胶层析的原理,大分子物质不能进入凝胶孔内,直接从凝胶及管柱间的空隙流出,而小分子物质则进入凝胶筛孔。0 u. R( \9 O; _5 r1 S) L
为什么小分子物质不会从凝胶及管柱间的空隙直接流出,而要先进入凝胶筛孔?(这有点类似牛顿的大猫小猫的故事,大猫走大洞,小猫走小洞)
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沙发
发表于 2011-11-29 14:39 |只看该作者
楼主其实没有真正理解凝胶层析的原理,确实不同分子量的物质是通过进出凝胶孔道来实现的,但不是就说小分子物质不会从凝胶空隙流出,而是说,小分子物质可以自由进出凝胶空内及空外,这样在反复进出的过程中,他们就需要走更长了路,而大分子由于无法进入,直接流出就会最早的从空隙流出,走了最短的路,所以,两种不同分子量的物质就一前一后流出来的,但是这是最极端的情况,只是为了好理解原理,那么如果两个或者很多大小不同的物质,有些都是可以进去的,有些都是无法进去的,怎么实现分离呢?就取决于分子越小越容易进去,而越大越大,这样,越容易进去的就倾向于走越长的路,但如果两个分子大小太相近了,可能通过这个方法就无法区分开,这就是为什么有些峰是重叠的,这时候为了达到好的分离效果,可能就需要里面凝胶孔径的大小,以及柱子的长度,理论上柱子越长会把组分按大小分离的越好!
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藤椅
发表于 2011-11-29 21:00 |只看该作者
回复 langziforever 的帖子9 g: e0 I% s2 C- r' L4 a
- Y* @% l$ w3 |
I see. 非常感谢!
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