培养干细胞要加双抗不？

hesu1105

不是肝细胞，培养的是人的胚胎干细胞，原代时用的浓度是传代时的二倍。实验室的条件是很好的，达到100000级的，不过前面的人做实验摸索的结果还是加了双抗的。我们又不敢随意更改公司的操作流程，除非有实足的把握，不然是要倒霉的啊。

happyab

如果你能在高级无菌室就可以不用，不然还是建议你加！如果怕对实验结果有影响，建议采取严密一些的措施，如空气高级消毒、减少不必要的操作！

youtellme

可以加，但要标明是加哪两种抗体的，以免影响结果。也可以做个对照啊。

happyab

可以不加就不加，怕影响试验结果！但如果无法保证试验环境的可控，就要加！# @' y: y  t/ ?+ B9 l0 j6 N$ t. [, i
建议在高级的无菌室操作，而且操作时间动作必须控制，减少暴露而被污染几率！& x+ q) S: `* K" n* i' a# ]5 l
如果不想加，又无法保证可以在高级的无菌室操作，建议采取预先密封消毒措施！

yinjiqingqq

个人愚见：你可以分两组一组加双抗，另一组不加。你们的实验环境达到十万级标准，如果操作得当，环境污染的可能性很小。关键是你的样品原代取材是否是无菌的。你的细胞原代就加有双抗，建议你不要立即撤掉，换液时双抗浓度减半，观察几天，确保细胞无污染再逐步减少浓度。

hesu1105

回复 yinjiqingqq 的帖子  N, ?4 {" q& n8 e2 O

2 ^' B( R7 V8 N& c2 q; B# d原代取材时在实验室外部进行，环境条件比较差，无法做到无菌要求的，所以是加双抗培养的，但培养到传代时应该可以不加双抗了吧。我是担心有双抗的细胞株会不会产生分化之类的影响，还有在产品进行医疗时会不会对患者产生负作用呢？

新疆八钢

回复 hesu1105 的帖子' D4 R: U/ U8 [" d- A
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一般情况下，如果没有特殊要求，可以加双抗；如果双抗干扰你的实验目的，那不能加双抗，双抗的浓度一般各为100u/ml。双抗不能代替无菌操作，加双抗是为了预防污染，一定要注意无菌操作。如果你的实验步骤加多，感染机会较多，一般应该加双抗预防感染。

sijicc

不做治疗就可以加

yinjiqingqq

回复 hesu1105 的帖子% e3 G7 f$ {5 i3 Z: }$ `3 a  W, B

) w# X# D* P, W: ?% h如果你是做医疗的话，就最好不要加，如果原代加双抗，你可以在后期传代中逐渐把双抗撤掉。

llecstem

根据实验室条件，现在的实验室没有缓冲间不加的话很容易染菌，以前不加啥问题都没有
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