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[请教] 培养干细胞要加双抗不?   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-12-26 17:24 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 hesu1105 于 2011-12-26 17:25 编辑
9 x: t0 Q$ `  ]; R1 k" |: w$ `! r; y6 \5 ~% \+ j9 B2 K. I
在网上的文献有的说培养干细胞可以不用加双抗,说是对干细胞有伤害。可是实验室又是要求要加双抗的,具体原因也不清楚,有知道的或者在这方面有经验的吗?请教下,尽量说的详细点,谢谢!

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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2011-12-26 19:07 |只看该作者
绝对可以加双抗,不仅可以加双抗,还可以加双性霉素来抑制真菌污染' W+ e) }4 w6 l3 r9 X! X: e
但是在电转的时候最好不要加双抗
7 ]$ j- X$ x! B+ J双抗的浓度可以参考成纤维细胞的浓度,或者减半都可以达到抑菌的效果
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藤椅
发表于 2011-12-26 19:36 |只看该作者
双抗仅仅是是起到抑菌的作用,实验室无条件非常好时,不加双抗是没问题的。如果环境条件一般还是加上为好,防止污染,
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板凳
发表于 2011-12-26 21:20 |只看该作者
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建议加  不然太容易污染了 1%就可以了
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报纸
发表于 2011-12-26 22:42 |只看该作者
  确实有文献报道说抗生素可能对ES产生负面作用。Antibiotics Reduce the Growth Rate and Differentiation of Embryonic Stem Cell Cultures。但你也知道,实验要取其利,避其弊。既想保证不污染,又想减少分化,怎么办?找个合适的浓度呗。得道一个平衡点。看你的实验要求了。
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地板
发表于 2011-12-26 23:31 |只看该作者
可以加啊

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发表于 2011-12-27 08:33 |只看该作者
主要根据你的实验室条件,双抗是起到抑菌的作用,实验室条件非常好时,不加双抗是没问题的。
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发表于 2011-12-27 08:58 |只看该作者
不要加双抗,这就是刺激了。。。要求很严格的~~
; T% h, ~  O: B6 w; Y还有就是你是人的肝细胞还是鼠的肝细胞啊?
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发表于 2011-12-27 09:36 |只看该作者
如果原代培养,肯定要加,而且往往使用“抗生素-抗真菌素”,甚至取材前的标本还要视情况碘伏浸泡。
9 O5 S8 @" O, n( c3 J( P% l如果细胞状态稳定了,实验室条件够的话,完全可以不加抗生素了。不放心的话,可以改用“青链霉素”或是“四环素”等等多种选择。
5 ]7 \2 b8 x1 X8 @7 R3 N4 M如果细胞要转染什么质粒,病毒等,要撤掉抗生素,抗病毒药。:)
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发表于 2011-12-27 09:51 |只看该作者
实验室条件还可以,从来不加双抗,没有过细菌污染。当然,如果实验室条件不好可以加。这个问题得视情况定。
. s9 R7 W+ q* o, T不过,个人认为双抗的作用并不太强,如果不注意该着的还是着,如果注意了无菌操作问题,一般不会有事。" w' z1 g2 {) Y- t7 t; X
但,做原代的时候再清洗液里可以加双抗,这样影响不会太大,又能抑制细菌增长。
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