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[请教] 培养干细胞要加双抗不?   [复制链接]

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发表于 2011-12-26 17:24 |只看该作者 |正序浏览 |打印
本帖最后由 hesu1105 于 2011-12-26 17:25 编辑 , N/ }( T, ?6 j/ l
6 v/ M1 u2 B: p& A2 [% G
在网上的文献有的说培养干细胞可以不用加双抗,说是对干细胞有伤害。可是实验室又是要求要加双抗的,具体原因也不清楚,有知道的或者在这方面有经验的吗?请教下,尽量说的详细点,谢谢!

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发表于 2012-1-29 20:22 |只看该作者
看你实验室怎么样啦。实验室好的话,就不需要加双抗,我就没加过。
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发表于 2011-12-30 17:08 |只看该作者
要加啊!我养过唯一一次污染的就是因为没有加双抗!
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发表于 2011-12-30 10:28 |只看该作者
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根据实验室条件,现在的实验室没有缓冲间不加的话很容易染菌,以前不加啥问题都没有7 o) x, t/ F5 |$ q( F% n
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发表于 2011-12-29 10:18 |只看该作者
回复 hesu1105 的帖子& O: V' {. P& Y! F7 }* q  F

: S4 c* J- b' ~- J8 U- H% `3 c$ b* B如果你是做医疗的话,就最好不要加,如果原代加双抗,你可以在后期传代中逐渐把双抗撤掉。
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发表于 2011-12-28 15:40 |只看该作者
不做治疗就可以加
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发表于 2011-12-28 15:32 |只看该作者
回复 hesu1105 的帖子
5 U8 o! ]9 S: \' R4 H" x' c, P3 }! |- P7 t' X' O) C2 o7 W; I
一般情况下,如果没有特殊要求,可以加双抗;如果双抗干扰你的实验目的,那不能加双抗,双抗的浓度一般各为100u/ml。双抗不能代替无菌操作,加双抗是为了预防污染,一定要注意无菌操作。如果你的实验步骤加多,感染机会较多,一般应该加双抗预防感染。
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发表于 2011-12-28 15:16 |只看该作者
回复 yinjiqingqq 的帖子
/ o2 N: K9 d" Z, M. _" n; V& X
& p/ w" Z3 ^9 c) G原代取材时在实验室外部进行,环境条件比较差,无法做到无菌要求的,所以是加双抗培养的,但培养到传代时应该可以不加双抗了吧。我是担心有双抗的细胞株会不会产生分化之类的影响,还有在产品进行医疗时会不会对患者产生负作用呢?

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发表于 2011-12-28 11:19 |只看该作者
个人愚见:你可以分两组一组加双抗,另一组不加。你们的实验环境达到十万级标准,如果操作得当,环境污染的可能性很小。关键是你的样品原代取材是否是无菌的。你的细胞原代就加有双抗,建议你不要立即撤掉,换液时双抗浓度减半,观察几天,确保细胞无污染再逐步减少浓度。
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发表于 2011-12-27 18:05 |只看该作者
可以不加就不加,怕影响试验结果!但如果无法保证试验环境的可控,就要加!/ }$ d; T' a* M& p& D; s
建议在高级的无菌室操作,而且操作时间动作必须控制,减少暴露而被污染几率!
1 ~' b# |; T1 B1 r0 O如果不想加,又无法保证可以在高级的无菌室操作,建议采取预先密封消毒措施!
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