脐带间充质干细胞分离和培养问题

tkpss18

大家好，我想请问一下有关这两个组织的培养问题。
  l# x0 s4 U$ ^( j1 s( [我们现在是利用组织平布法来培养脐带间充质干细胞的，我们一般要等大概7-8才会有细胞爬出来。然后我们发现也不是每一块组织碎片也会有细胞爬出来，大概是每10块有2块是有细胞爬出来的。而且细胞爬出来以后生长速度也比较慢。我们用的培养基是15%PBS+84%DMEM+1% L-Glutamine+50ul Gentamicin. 我们是在第6天换第一次液，然后每4天换一次，我想问一下大家是多久换液一次的？然后你们一般会等多久才把组织块从培养皿上去掉？# [! H0 n5 N8 B7 e1 w! I

都市青蛙

15%PBS+84%DMEM+1% L-Glutamine+50ul Gentamicin？？？？8 z, N# m; ^$ u0 `
都不用血清的呀

tkpss18

不好意思，是FBS才对。。谢谢。

leungyk

我們用DMEM/F12+10% FBS+glutamax，每3-4天換液，亦不是每塊組織都有細胞爬出來，都是大約7-9天才會有細胞見到/ |( ^* I9 s/ }+ r+ e" s6 p( P
我們亦發現StemPro+10%FBS會長得比DMEM/F12快1-2天 (如果StemPro沒加FBS，就跟DMEM/F12差不多)

漂泊的风

一般要一周才到组织块，当然也要看脐带，有的脐带爬出细胞的速度很慢，要十来天才能长满，要是具体情况而定。

tkpss18

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: Q! g3 p9 [8 S2 u0 I$ T那你们是有细胞爬出来就直接把组织去掉？还是会先保留组织块？如果保留组织块的话，要让细胞长到什么程度才可以把组织去掉？然后细胞爬出来以后你说是3-4天换液，那你们是半换液还是全换液了？谢谢。

tkpss18

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  @. o, V% E" X8 R7 z/ f那长不出来的组织块，你们会怎么处理？

leungyk

tkpss18 发表于 2011-12-30 10:59
( H; Z3 J; `6 p. A9 p回复 leungyk 的帖子. \3 D9 j/ g4 B' g$ e2 {

! I/ c( F5 U* \' `, z/ F& W5 H那你们是有细胞爬出来就直接把组织去掉？还是会先保留组织块？如果保留组织块的话，要 ...

& U1 z- P  {+ U8 n
我們會保留組織塊至傳代才去掉2 [" m/ V4 d9 |
是全換液的3 p. u6 X  C. \1 y& B

tkpss18

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- D/ f# d- x- B+ B$ n2 @; q/ q! h( m2 g6 @  L
学习了，谢谢~

shashou_com

回复 tkpss18 的帖子7 H1 c: g! u2 }  L  h. S

$ ^$ O0 `" l1 \4 [( z; y$ [# |一周后换液一次，保留组织。等待细胞长满整个培养瓶后才传代，去掉组织块。