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楼主: 哇牛
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脐带间充质干细胞的贴壁分离方法   [复制链接]

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金话筒 优秀会员

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发表于 2012-1-6 16:24 |只看该作者
个人认为组织块法比较好。酶消化时间比较长。且对细胞有伤害。
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发表于 2012-2-15 13:07 |只看该作者
贴壁法,顶一个,不错
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发表于 2012-2-15 13:33 |只看该作者
回复 单个核细胞 的帖子; T6 G8 W+ a& W$ ~! N
' f4 _+ u9 }, U
请问你图片上的第一张2cm脐带的图 是去除了外膜的吗?; [! J( [! r# V! b9 B: k+ P
血管切除时血管上会粘有很多华通胶,而最后得到很少的华通胶怎么办
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发表于 2012-2-15 23:53 |只看该作者
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有文章比较过两种方法,组织块贴壁法获得的细胞比较均一,但是时间长,可惜自己没有比较过这两种
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发表于 2012-2-21 21:17 |只看该作者
Method to Isolate Mesenchymal-Like Cells from Wharton’s Jelly of Umbilical Cord
/ c1 t" k3 k' a1 i, R大家可以看下这篇文章,有详细的步棸及图片说明
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发表于 2012-2-22 09:02 |只看该作者
个人感觉贴壁法太慢了!我曾经贴壁和酶同时做,酶消化的都第二代了,贴壁法才刚刚可以传代,也有可能是我自己没有处理好,虽然原代处理的时候贴壁法的确没有多少成本,但是它的周期长,在这过程中又要不停地换液,还是要成本,所以我现在都用酶消化了。
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发表于 2012-2-22 09:21 |只看该作者
以前我同时做过贴壁法和酶消化法,贴壁法的周期太长了,当酶的已经传到第二代时,贴壁法还不能传代,虽然贴壁法原代处理时不需要多少成本,但是由于培养周期太长,期间要不停的换液,所以消耗的培养基也多,所以现在我一般都用酶的。

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发表于 2012-2-22 09:42 |只看该作者
回复 king8 的帖子! J! ^* e2 Z, `" j; y% o
7 u" p* f& j4 E
这位兄台,不知道你说的机械法纯度不高是怎样一个标准?我没做过酶消化,只做过机械法。我们用的流式测纯度能到98左右,当然只是流式结果,其他的方面没有做。不知道酶消化能多高?还有有人说酶消化由于有化学物质,可能对细胞有损伤,你觉得有影响么?仅从细胞状态来说,这两种方法哪个更好些?
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发表于 2012-2-26 10:58 |只看该作者
我酶消化法和组织块法都做过,酶消法快呀,1天就见到细胞贴壁,1周左右就可以传代,组织块最少7天才有细胞迁移出,传代最少要1月,我推荐酶消化法用的胶原酶2(浓度1mg/ml),消化4小时就可以了
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优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2012-2-26 11:29 |只看该作者
用过贴壁法,没用过酶消化法,所以没有比较过两者的效果哪个更好。不过对于贴壁法的看法,还是比较赞同“六楼”andreqin 的看法的。
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