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小弟培养C57小鼠骨髓间充质干细胞已近3个月,结果不满意,基本情况如下:
4 t* p- a# w: c$ I骨髓冲洗法取小鼠胫腓骨骨髓,全骨髓原代培养,用的是DF12,10%南美血清,48h首次换液,2~3天全量换液,有以下问题想请教各位前辈:
7 ?7 B8 P r9 H8 F6 n1.目前这一批P0第9天,感觉也就50~60%而且与3天前相比似乎没什么太大变化,好像不长了一样(我是每只小鼠,两条后腿的骨髓种在一个25cm瓶里),请教C57 BMSCs的生长周期?, S' C; x3 @1 ]2 A$ r/ Z
2.细胞大致呈现两种形态,一种小的(有类圆形,大多为长针型),一种大的(或不规则,或扁长,且此种细胞聚集在一起似伤口结痂般,特别难看),而且两种细胞在生长密集的区域似乎呈复层生长,请教哪种是MSC?或者大细胞是老化的?几代以后会不会变的更纯/均一一些?(因为以前养的几批到P3就不长了,不知道怎么回事)
2 C) P" q/ }2 s5 l( y; Q
/ C) o L4 a6 j" I% t; rPS:图片分别为3瓶细胞两种倍率下的图片 |
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