|
- 积分
- 37
- 威望
- 37
- 包包
- 153
|
经验：
1 ~1 S `2 a1 S, \9 O 去年养的两批c57 BMSCs （全骨髓培养法），不管是原代还是传代，都很难消化，试过用2×的胰酶（0.5%浓度）也得10min左右，而且还在瓶底剩余30%左右（细胞早就变园了，但是不管怎么晃动、拍打、吹打，都不下来的）感觉对细胞肯定有损伤，传到3代以后就不怎么见长了。
9 s4 F" m* ]* x/ x( ~) B! s 今年刚养的这一批前天刚传代，用了0.25%胰酶-EDTA (GIBICO进口原装)，并且每次都用分装好的1ml，现用现解冻，并且37℃预热10min，在保持温度的情况下迅速加入培养瓶，37℃孵箱孵育5min，发现消化效率大大提高，5min时在显微镜现观察，半数细胞已飘起，再晃动瓶子几下就全部飘起了。
' ?+ a: d: [9 S; F问题：
! J8 V$ H* `1 N1 s4 _ 去年到现在，看了很多关于小鼠骨髓间充质干细胞消化的帖子，但很多观点却是互相矛盾的，有人说MSC是先被消化下来的，或者说先消化下来的MSC活力比较好，利于接着往下养（包括昨天看的一篇07年2.8分的文章，也是选用胰酶+EDTA 2min内消化下来的）；但是有更多的人却说MSC是贴壁较牢固的一种细胞，应该是后消化下来的，甚至在一本细胞培养的书上也是说BMSC贴壁较强，较难消化。- L& }5 C2 i/ h: s9 j
众所云云，让我很费解啊····不知道大家都有什么经验，或者看到过权威的方法，恳请不吝赐教！
$ o5 z9 a- Z2 W4 B% P; k# QP.S.请注意，这里说的是小鼠的BMSC，不是别的动物或人，也不是小鼠的其他组织的MSC，因为实在是存在差别，所以如果说的不是小鼠BMSC，还请注明，谢谢！ |
-
总评分: 威望 + 10
包包 + 20
查看全部评分
|
发表于 2012-2-21 09:51
