大家有用KOSR-CTS培养hES的吗？长的怎么样啊？求分享

BDFCM

大家有哪个实验室用KOSR-CTS开始养hES的啊？以前的KOSR不能进口了，不得不用这个了，可细胞长的不好看，很多分化的。
6 K" F" ?, y4 O( e/ e( E/ q! \说明书上面的配方是用DMEM, 15%KOSR-CTS, 8ng/mL bFGF, 但因为原来基本培养基是DMEM/F12所以就按照以前的配方，只是把KOSR换成KOSR-CTS。
  @( a, Z! r- @0 A6 S, ~' c大家有谁用过的，分享下经验吧，嘿嘿，让细胞长的更漂亮

zhusealin

我们已经换成xenofree-CTS养hES了快两个月了，状态还行，就是形态与原来的SR相比有差别，细胞比较大而平。配方还是用的DMEM/F12，bFGF 8ng/ml。换的时候需要逐步过渡，这样效果会好一点。关于怎么逐步过渡，这个说明书上有详细说明

南宫燚岚

对的，要做一下adaptation过程，避免ES发生分化现象……现在国内还有几家公司有KSR的存货，lz可以联系一下，上海前尘公司好像有。

YLL824WAN

回复 zhusealin 的帖子- P( _" A( @6 d% |
" B+ R" a. P$ Q7 j, x" h
你好！我马上也要做这方面的，也是买的xenofree-CTS，我是想请教您一下，你配的完全培养基的配方是什么呀？需要加LIF吗？谢谢啊！呵呵

BDFCM

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0 H4 p! t& k8 J  w" n
* J0 ]+ Z2 b5 ^2 V在xeno-free-CTS体系里，你试过用4ng/mL bFGF吗？你的CTS是20%吗？

zhusealin

xeno-free-CTS体系里, 配方我们是按照说明书上配的，只是没用说明书上的DMEM，用的还是DMEM/F12, bFGF是8ng/ml，CTS是15%，其它条件都跟原来的SR配方一样。我们是做了adaptation过程，从25%，50%，75%,最后到100%，用了近一个月时间，细胞才完全适应的

BDFCM

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; b* ~1 M3 J$ N7 M* X  e) n那在adaptation的过程中，有没有看到细胞异常分化？克隆周围有成纤维样细胞长出？克隆类似荷包蛋状？

YLL824WAN

回复 zhusealin 的帖子% A" ]! M& v3 J  M7 w. i
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你好！请问你在培养hES过程中有加LIF吗？本人之前看过文献有说要加1000U/ml，就买了，结果好像说明书里没有加LIF，想请教一下啊！谢谢啊！

zhusealin

培养hES不用加LIF，加bFGF就可以了。

hushishu

一般