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楼主: 冠忠
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CIK 细胞图片   [复制链接]

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11楼
发表于 2012-3-21 10:56 |只看该作者
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+ n3 T" p2 N& J1 A7 o
9 j: P+ H; C! x  u( v1.细胞数量都会增加,但CIK细胞数量所占比例也会增加,具体增加多少需要做流式检测。
& P" o2 q  g( x6 s% E, b$ R0 {- r2.可能是一些细胞团吧,能弄散最好弄散,一般好像补液或换液后会自动分散开。4 g6 c) a! c1 E+ \/ Q
3.我看的文献上有说加IL-2的,你可以试验一下加不加有区别没。
1 {6 S/ R  W/ f: n4 `9 K, _4.这个当然可以,不过最好不要被染菌了
' a  w; U3 Q8 {0 g) z# t5 `' w5 w5.你可以在显微镜下看看,细胞浓度大的话,可以换啊,,小的话就算了,别浪费。
5 E9 T2 F3 b* z& b以上仅供参考。
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12楼
发表于 2012-3-21 16:05 |只看该作者
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, M5 J$ ]( |, M$ u; A  \+ o. c8 [' g& C
从你的图片来看,黑色团不是细胞是培养瓶盖子上掉下去的一些黑色朔料!你的细胞碎片很多,可以收集处理!加新的培养液!以后达到密度后半量液传代就行!最后在细胞对数生长期一天一传得到目标量的细胞!
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13楼
发表于 2012-3-21 16:49 |只看该作者
看细胞密度,还可以再长。如果现在半量换液细胞密度可能会比较低,不利于生长。
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14楼
发表于 2012-3-22 01:08 |只看该作者
谢谢各位师兄赐教,小弟获益良多。
9 K/ m) N4 B1 Q( U4 V5 j9 x: G% d! j; t3 ?
我想再了解:9 Y* t) e  q4 H3 _' d
+ {2 y) i+ f5 p8 q* x# l8 b& o5 a& r: k
1.        我知道培养细胞之浓度最好是1x10^6/mL,我是用血球计数器(hemocytometer)去数细胞,但是大家都知道,细胞数量可以很大,请问是否要稀释好几倍先可以数细胞?
8 Y! O7 b: ^% I( `5 q  j% W$ s4 l" x% R
2.        我想问一下,过了几天后,细胞增值速度是多少?:一天一倍?还是几天一倍?- s5 {4 m+ [( o4 X" E: o8 R$ y! d
: i. Q( Y- e+ |% D
3.        有关细胞碎片,请问是否用离心换液就可以处理好?为什么会有那么多细胞碎片?可以预防吗?5 d& K9 W$ w2 d+ _) }

# u! g& \  x4 G4.        请问CIK妯胞在浸在PBS环境里,室温,可以存活多久?8 R5 B; U3 B4 {7 z) N

) y# T8 B- \) a1 B7 @5 L谢谢大家
; K, g0 Q, y% w3 l# q% N: V
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小小研究员

15楼
发表于 2012-3-22 22:46 |只看该作者
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- o  y0 I/ f% K5 ?# f/ F" p- m. M  e% a2 X' c: [6 k
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16楼
发表于 2012-3-24 10:37 |只看该作者
我看着像细胞结团了
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17楼
发表于 2012-3-29 16:48 |只看该作者
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/ r2 B/ O5 g* s' I1 _
2 m- p& ^# k8 E1. 用CD3单抗和IL-2刺激是以扩增CIK细胞为主,但是T细胞也会增多。! v) v1 a. d9 I# W# I. l
2. 是克隆团,长的特别大的时候要吹打一下,防止里面细胞生长的不好。
- @7 a  m; T) ?3. 实验证明不需要
) s8 e, G1 u" q  T4. 一般是3天直接补液进去,关键还是看颜色是否变黄,密度是否大。
% @& k  K" L: I6 G
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18楼
发表于 2012-8-20 11:12 |只看该作者
黑色的团块是淋巴细胞增殖的团块的,并不是所谓的什么掉下去的塑料,这是好现象,团块都上浮的时候可以吹散,让DC作用到更多的淋巴细胞,长成CIK。
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19楼
发表于 2012-8-20 12:48 |只看该作者
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+ F! E; Y6 Q* b0 I) n' v& \' M' P: C! M! M4 K+ m
1. 我们是用的血液分析仪计数的,用计数板的话我觉得应该稀释后再计数。
0 k0 Z2 C  Z) `2. 我们养的CIK是两天翻一倍。4 \' M8 J, o# _6 q8 N4 Z
3. 细胞碎片的存在是正常现象,只是操作好的话会少些。在换液时我们进行对比过,离心会对细胞造成损伤,从而增加细胞碎片的量。因此换液时不再离心。
  `" u: B5 c  [+ N& U4. 这个问题我也不知道,没做过,期待高人指点。
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20楼
发表于 2012-8-22 09:53 |只看该作者
1.关于数目的增加,所有的单核细胞都会增殖200-300倍,/ ~  I( N' M! B3 S; |" [5 Z+ U
2.图中的黑色球状无为细胞碎片的聚集物,离心换液后会消失的。你上面的那张图我自己觉的应啊做个半量离心换液最好。( v! G* x4 ~8 @7 r
3.显微镜下观察细胞的生长状态,密度,培养基中细胞碎片的多少来决定是否需要换液、传代。2 Q( z& c( B7 o8 g% U
4.我建议每4-5天半量换液一次(除非细胞非常的少,但也需要补充因子。)。也需要补充因子。
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