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楼主: 冠忠
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CIK 细胞图片   [复制链接]

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11楼
发表于 2012-3-21 10:56 |只看该作者
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$ H* `, z/ M. a+ ^! U) n; T; g6 j1 G4 f$ X
1.细胞数量都会增加,但CIK细胞数量所占比例也会增加,具体增加多少需要做流式检测。
; U8 h5 e2 k- a; j( {. g2.可能是一些细胞团吧,能弄散最好弄散,一般好像补液或换液后会自动分散开。: ]) }- G9 p6 N1 g0 ?* J
3.我看的文献上有说加IL-2的,你可以试验一下加不加有区别没。
, G% i. l* M* U* ^" R. g3 U4.这个当然可以,不过最好不要被染菌了& U) E3 x! r. {5 M
5.你可以在显微镜下看看,细胞浓度大的话,可以换啊,,小的话就算了,别浪费。! y$ L% b9 Y" w% S
以上仅供参考。
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12楼
发表于 2012-3-21 16:05 |只看该作者
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8 a! r1 Z- c4 V5 ~1 C* a' h9 h
# |! Z. U# x( [3 o/ a" }% o$ ?: Z. s从你的图片来看,黑色团不是细胞是培养瓶盖子上掉下去的一些黑色朔料!你的细胞碎片很多,可以收集处理!加新的培养液!以后达到密度后半量液传代就行!最后在细胞对数生长期一天一传得到目标量的细胞!
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13楼
发表于 2012-3-21 16:49 |只看该作者
看细胞密度,还可以再长。如果现在半量换液细胞密度可能会比较低,不利于生长。
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14楼
发表于 2012-3-22 01:08 |只看该作者
谢谢各位师兄赐教,小弟获益良多。" e% t1 l* K, }: {  `4 \

. g2 C: u/ a% g9 F1 F1 f我想再了解:5 }- E2 E$ ?. [0 t' X

  G" [7 ]6 C& [( J. d2 X/ ^' A1.        我知道培养细胞之浓度最好是1x10^6/mL,我是用血球计数器(hemocytometer)去数细胞,但是大家都知道,细胞数量可以很大,请问是否要稀释好几倍先可以数细胞?
! q6 m0 Q1 O% F5 E7 _9 y% u$ J; O* S  T
2.        我想问一下,过了几天后,细胞增值速度是多少?:一天一倍?还是几天一倍?
3 K8 p2 F/ d! x+ y0 u. B1 e* I) r. p. M( {; T
3.        有关细胞碎片,请问是否用离心换液就可以处理好?为什么会有那么多细胞碎片?可以预防吗?
+ {& a" U+ {  V% S. \+ o4 ]/ J- @' k4 L) E% K
4.        请问CIK妯胞在浸在PBS环境里,室温,可以存活多久?6 Z3 m6 n" {4 h4 F
% A7 S3 D1 J3 m5 M, l$ w
谢谢大家' ], j: U4 b' K
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小小研究员

15楼
发表于 2012-3-22 22:46 |只看该作者
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5 |5 I6 D" |! Z5 p* H. Y8 a6 o9 E7 l* _9 V6 k/ Z! L
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16楼
发表于 2012-3-24 10:37 |只看该作者
我看着像细胞结团了
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17楼
发表于 2012-3-29 16:48 |只看该作者
回复 冠忠 的帖子) j2 a% I/ c" S( o

" O) _# I! p; W  o4 c& o1. 用CD3单抗和IL-2刺激是以扩增CIK细胞为主,但是T细胞也会增多。2 Y( N4 \0 `; d
2. 是克隆团,长的特别大的时候要吹打一下,防止里面细胞生长的不好。
0 s) l1 U# v( l) w& r% j3. 实验证明不需要9 E" B$ o- p# x" D; J
4. 一般是3天直接补液进去,关键还是看颜色是否变黄,密度是否大。- k  U! W2 d/ R- g+ m9 I% K
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18楼
发表于 2012-8-20 11:12 |只看该作者
黑色的团块是淋巴细胞增殖的团块的,并不是所谓的什么掉下去的塑料,这是好现象,团块都上浮的时候可以吹散,让DC作用到更多的淋巴细胞,长成CIK。
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19楼
发表于 2012-8-20 12:48 |只看该作者
回复 冠忠 的帖子" o- ]* M* a# e
  G: c- h7 z3 B* R& C3 y' `
1. 我们是用的血液分析仪计数的,用计数板的话我觉得应该稀释后再计数。* A( D* J! s) ]1 b. L  h: W. d
2. 我们养的CIK是两天翻一倍。
) H' f" d1 i" I$ q3. 细胞碎片的存在是正常现象,只是操作好的话会少些。在换液时我们进行对比过,离心会对细胞造成损伤,从而增加细胞碎片的量。因此换液时不再离心。" ]4 L" n, {! H( K
4. 这个问题我也不知道,没做过,期待高人指点。
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20楼
发表于 2012-8-22 09:53 |只看该作者
1.关于数目的增加,所有的单核细胞都会增殖200-300倍,5 n1 d' A4 V! S& ^1 }% ~$ N
2.图中的黑色球状无为细胞碎片的聚集物,离心换液后会消失的。你上面的那张图我自己觉的应啊做个半量离心换液最好。
$ Y) \2 |8 C4 C4 O$ M( T: c" S3.显微镜下观察细胞的生长状态,密度,培养基中细胞碎片的多少来决定是否需要换液、传代。$ o  A8 {' `  X; e
4.我建议每4-5天半量换液一次(除非细胞非常的少,但也需要补充因子。)。也需要补充因子。
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