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包包
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楼主
发表于 2012-3-20 01:27 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
新手一名,麻烦各位师兄,可以给我一些意见。8 z  t! O& \/ R- N8 s5 O, b: J

& \) m4 ?, k6 a  q我想问一下,如果要换液,请问是用离心方法好,还是直接加一半新的液好?7 _/ K, G7 h1 v) H) p% g& q0 J% S3 z
" M1 X( b, J! J! r
谢谢
. c5 \2 O6 f0 P" w+ c7 h
" ?9 L& n  B1 y6 x7 E. S1 o# ^! {, B/ ^6 j
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沙发
发表于 2012-3-20 08:36 |只看该作者
直接加新的试试。
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藤椅
发表于 2012-3-20 08:38 |只看该作者
直接加也比较好,好多文献上都是这么做的
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板凳
发表于 2012-3-20 08:51 |只看该作者
你可以根据具体情况:1、如果细胞培养天数不多,如2-3天,且培养液未达到瓶口(容易污染的地方),可以采取半量换液,也就是加新的液体进去。2、如果培养天数较多,到了该传代的时间,那就要离心传代全量换液了。3、根据细胞生长情况,对数生长期的细胞建议半量换液,过了这个时期就要传代全换了。一定要自己多观察,总结经验,多试验。以往的文献仅供参考,不可全部照搬照抄啊。摸索出来适合自己的的就是最好的。学无止境,实验也用无定论,哈哈,仅供参考。
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金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2012-3-20 08:56 |只看该作者
你的图片看过了,也只是一个视野里面的细胞,第一张图看细胞球(大的和小的)比例基本各占一半,应该不算“老化”,应该半量换液就可以,但具体情况还要靠自己去观察,去摸索。只有自己才能看到最全面最真实的情况,别人的(包括我的),仅供参考,祝顺利!
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地板
发表于 2012-3-20 10:14 |只看该作者
半量换
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7楼
发表于 2012-3-20 10:40 |只看该作者
这个最好还是要看细胞的状态吧,如果你觉得碎片比较多,你就可以全量换一下,如果碎片不多,可以考虑半量换液,个人意见哈
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发表于 2012-3-20 13:40 |只看该作者
我觉得不用换,直接加新液就行。你在培养瓶还是袋里?
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9楼
发表于 2012-3-21 00:31 |只看该作者
谢谢各位师兄的意见!!* X5 c! `5 Y0 c, L5 S. z

; O3 @( }9 ?; t) A) L* ^* G我还有几个问题想问一下:( i* j+ Z: B& n) Z% n4 k

, j$ j5 a' }; y0 Y8 l3 Z1.        我在文献中看到,很多时候都是说可以增值200-300倍,我想了解是CIK细胞数目增加,还是其他单核细胞都会增加?0 F. `* \% k# n: `. m
' `0 K- Q- F7 f, P' h/ Y2 Q% f
2.        在图中,有一团团的黑色东西是什么来?要弄散吗?' @* b1 j( E0 r0 ?1 H1 f. N$ r
# E' Q" E# \6 p& m
3.        在文献中,有些说换液时有加Anti-CD3,有需要补充吗?
, n" ^# x0 q' K, ~/ {) ]6 A8 @9 C+ h9 w
4.        可不可以在显微镜下看培养皿决定要不要换液?2 Z+ i) `" }5 Q9 @
3 M+ I& ^% k2 d- ^
5.        我在培养的时间,过了好几天,培养液都没有变色,我应该根据3-4天换液,还是等待培养液变色?
& A; y5 z. d+ v. x. p. s
/ P1 K" _: l; L9 d: X谢谢# ~& [0 ~8 ]% P$ W( H! w
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10楼
发表于 2012-3-21 00:56 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-3-21 00:57 编辑 $ @5 t8 C1 p4 Z% Q2 ]
) a9 N9 _! x  J/ ?% [
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