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楼主: 细胞干
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请教酶消化法培养脐带间充质干细胞的问题   [复制链接]

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包包
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发表于 2012-4-18 00:00 |只看该作者
消化过后一定要大量稀释、清洗,酶对细胞损伤很大
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发表于 2012-4-18 18:06 |只看该作者
消化后可以加血清终止反应的,不需要稀释!
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发表于 2012-5-23 22:41 |只看该作者
回复 细胞干 的帖子- {% C' _# D6 v4 r' J
0 |9 i( |5 B3 |8 I
我一般的做法是不是全把上清去掉,慢慢吸,剩下最底下的1-2ml,这样保证细胞不会被倒掉。. s/ M; F! j; O) o
我之前做过拿胰酶消化的,感觉效果不明显,还增加了步骤和污染的机会,所以没用胰酶了,感觉也挺好的,应该是先过滤再离心,这样大的组织块就可以先去掉了
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发表于 2012-5-24 15:38 |只看该作者
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开始培养脐带间充质MSC时,我用0.1%的I型胶原酶消化,消化过后没有用PBS大量稀释、清洗,细胞受损伤,虽然有大量的细胞,但是由于有胶原酶附着,细胞也被消化了。组织块培养7-10天,就有MSC从组织块爬出,更容易得到MSC,为什么要用酶消化法?
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发表于 2014-7-11 20:10 |只看该作者
回复 pailishi 的帖子8 F7 d4 t0 t9 m8 g

& O6 C+ o4 G. U. u跪求酶消化法培养脐带间充质干细胞的操作步骤。

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发表于 2014-7-11 20:10 |只看该作者
回复 pailishi 的帖子' [: C2 H2 H8 y5 ^: R, i: j/ ^# V
# t: F, v* b! [7 X7 I. v' a( q
跪求酶消化法培养脐带间充质干细胞的操作步骤。

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发表于 2014-7-12 10:33 |只看该作者
回复 pailishi 的帖子
9 W3 Y- L  V  c4 k7 \! A2 o8 X' d$ K; C& y" R  a5 Z
用哪三种酶消化,三种酶的浓度与加的量各是多少??????求教,谢啦!!!!

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发表于 2014-7-12 10:51 |只看该作者
回复 2013sp 的帖子
9 ]1 a- P5 l8 C3 s  O; l- b4 U
自己去查别人的硕士毕业论文吧,详细得很

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发表于 2014-8-28 22:51 |只看该作者
回复 pailishi 的帖子
$ K5 s9 \  z% ?3 j) r7 d0 t/ l8 c! m, j& H
请问使用哪三种酶以及浓度、用量。, K+ l" r% a1 X1 ?8 i5 Y+ B

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发表于 2014-9-1 09:09 |只看该作者
用一型和透明质酸酶混合试试
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