求助为什么有mES细胞的滋养层变密变多了

YYQ6301

向大家回报一下进展：目前认为楼上的可能性不大，因为我已经把这些细胞消化出来培养了，目前长的很好，稍后上传照片，希望大家积极发言，踊跃讨论，期待大家的高见！！！！

YYQ6301

传代后第2天传代后第3天传代后第4天

YYQ6301

干细胞里混了其他的细胞，可能吗？

YYQ6301

   没人来踩啊

YYQ6301

经过多天的观察，我们讨论后认为是mES分化了

XIE冬D

我觉得丝裂霉素C处理是一个方面问题，但是主要的还是传代的时候带进去的feeder，因为我自己也出现过这种情况，养到后来滋养层细胞很密，后来师姐就让我传代接种前用gelatin悬一下feeder，后来情况好多了。

lhw7514093

1，MMC处理不好，EF还会分裂，导致EF量增加，
6 ?$ G) z% Z; @) C: i6 i3 m( Z2传代的时候会带进去一部分的feeder，会增加一定的密度，0 Y5 m1 `* `, ^
3ES细胞分化后的细胞也会扑到皿内，也可能视觉上增大了EF的密度。) M! f+ a  f; o4 w! |
如果排除了第一点MMC的问题，那剩下的按时传代就应该没什么问题。

YYQ6301

回复 lhw7514093 的帖子: ~% u8 r% ^8 M! ^) a, {
, @' D- o; C- P) B
你好，谢谢你的回复。根据我目前收集的资料和观察情况，我觉得我们的MEF应该是处理到位的。MEF在后期长的比较缓慢，传至八九代就基本不长了，而我的类饲养层细胞生长良好，两天左右就能长至上面的图片情况，而且可以继续增殖，主要的是克隆周围的一圈长的特别好，感觉就是从克隆里伸展出来的，所以我们排除了MEF出问题的可能性

lhw7514093

MEF基本是用三代以内的，太高代次不好了