IPS分化严重

sarah19860420

为什么IPS在传一代后突然全都分化了呢?没有任何条件改变

panyanfei

能说详细点不？另有图片吗

genedu

培养基有没有配错啊，酶消化的时间是不是过长啊，培养箱中间是不是断过气啊... ...
9 E+ E% v1 z* A$ y" [# Q如果是刚刚挑出的克隆，再传第二代的时候，很多都有分化现象，当然您还没有说你的是什么iPS，小鼠的分化现象不是很严重，其他物种的... ...  p# f& Y2 H- L# J; l8 O
还有您用的是什么培养体系啊，mES，2i... ...

牙牙丫丫123

建议你把图片附上，而且把情况描述的详细点~什么培养基、多少代、是一直培养还是复苏培养等?

sarah19860420

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6 U* I% l- i% r- ]6 u
1 w  ~3 `: z: K3 S+ a我养的是人的IPS，IMR90，在26代复苏后一直在培养。但是其他条件都没变。在传代的28代时就发现有一些分化的克隆，接下来就传代基本就属于全分化的状态。传到30代时，克隆贴壁 也比较少。即使贴了，也是分化的。细胞室的显微镜是没有相机的。所以不能照相，5555但是分化状态和之前群上传的分化细胞状态差不多。28代时大多都是在中心开始分化的。

sarah19860420

回复 genedu 的帖子- E; S8 e0 Q  o- I
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我养的是人的IPS，IMR90，在26代复苏后一直在培养。但是其他条件都没变。在传代的28代时就发现有一些分化的克隆，接下来就传代基本就属于全分化的状态。传到30代时，克隆贴壁 也比较少。即使贴了，也是分化的。细胞室的显微镜是没有相机的。所以不能照相，5555但是分化状态和之前群上传的分化细胞状态差不多。28代时大多都是在中心开始分化的。

sarah19860420

回复 panyanfei 的帖子, R) j5 B1 G' N9 a, f

- k. S( X: P5 s3 q! E% q我养的是人的IPS，IMR90，在26代复苏后一直在培养。但是其他条件都没变。在传代的28代时就发现有一些分化的克隆，接下来就传代基本就属于全分化的状态。传到30代时，克隆贴壁 也比较少。即使贴了，也是分化的。细胞室的显微镜是没有相机的。所以不能照相，5555但是分化状态和之前群上传的分化细胞状态差不多。28代时大多都是在中心开始分化的。

jj.jianjia

是不是传代的时间太晚了？你是不是在feeder上长的？我在feeder上长的也一直分化的比较多。matrigel上长的就好多了。只要克隆不长过头，就没问题。

sarah19860420

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( v9 ]# p* R, e, C  ~! o0 `
1 K' d7 d! l8 _: o可能吧，反正现在我已经放弃了。╮(╯▽╰)╭，谢谢

wangxiang

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9 D! y4 h" j0 d; l9 S0 j
我的iPS细胞大概也是15代左右，然后也是传代后容易分化。