贴壁的肿瘤细胞和悬浮球的表面标记怎么没有差异呢？

wuhui1985

* h+ m+ T* g3 L. I6 g! w6 d# F( o- U! ?4 B- {
我将贴壁生长的肿瘤细胞系用无血清培养基培养成悬浮肿瘤球后，用流式分析技术比较二者的表面标记差异。
  o: B" v4 l# A1 M# M+ Z8 i5 m结果发现贴壁生长的肿瘤细胞与肿瘤球细胞的表面标记并没有明显的差异。 这是为什么呢？ 3 N( M5 u2 ~8 g7 p
在我看来，贴壁生长的肿瘤细胞悬浮成球培养长达2个月后应该就是肿瘤干细胞了，能够出现文章中报道的肿瘤干细胞的表面标记。而贴壁生长的肿瘤细胞不应该有这些肿瘤干细胞的表面标记……结果我郁闷了  ……。跟我设想的不一样呀 。
* S7 s5 q4 z" k% o4 `4 }难道这些贴壁生长的肿瘤细胞系实际上就是类似肿瘤干细胞的细胞？因为它们可以无限传代，也可以在小鼠中致瘤。
1 u4 V2 Z% e4 Z  [& \5 J3 e" o0 g求大家意见……。

cneagle66

细胞球细胞是不是也可分化，有没有最初几天的细胞球检测结果？

zz091115

细胞系是筛选过的 如你所说 可以无限传代，也可以在小鼠中致瘤 细胞系上做marker的表达差异检测的确是没大差别 而且大部分细胞都带着这些marker

zz091115

回复 cneagle66 的帖子' ^  M$ @/ I' M% l4 F  W

$ `6 O) Q  }2 n分化与否不是关键 关键是分化了它也理论上不该有这些marker

wuhui1985

回复 cneagle66 的帖子" b6 ]. I8 [8 Q, s* n% l* P; f
2 u" A/ V- J7 X  L, F# s' G& o
我并没有检验最初代次的细胞球表面标记。。。而且我认为细胞球在无血清培养条件下应该不会分化吧。。。无血清培养基中没有血清，而是B27，并且有EGF和bFGF这些促进细胞增殖的因子

jojomayer

回复 wuhui1985 的帖子7 }/ B3 e, c9 r" ?3 |- V, K

$ P2 J+ W' j6 \- [. \请问你用的分别是哪几个标记？我看文献看来看去没有一个标记是完全权威的，都有反例，所以也许最好是同时多做几个标记。
1 C  v0 n5 S! j文献里面看到，肿瘤干细胞样细胞，肿瘤前体细胞和已分化的肿瘤细胞三者处于一个动态平衡，同时存在，只不过无血清条件能抑制分化。

jojomayer

回复 wuhui1985 的帖子2 C- C5 R# M: e2 w
* }" q7 h0 Z$ W, O! n4 t
请问你用的分别是哪几个标记？我看文献看来看去没有一个标记是完全权威的，都有反例，所以也许最好是同时多做几个标记。
5 h& s4 A3 b6 v( X$ n文献里面看到，肿瘤干细胞样细胞，肿瘤前体细胞和已分化的肿瘤细胞三者处于一个动态平衡，同时存在，只不过无血清条件能抑制分化。

wuhui1985

回复 jojomayer 的帖子
, k5 v4 _2 X9 p7 l- s+ \& s% U; M# e* q/ Q4 r
我用的肠癌干细胞的表面标记，文章中报道过的有CD133, CD44, ESA和CD26。

小木梅

先看看文献有没有报道过你所用的细胞系的成球培养实验，还要排除实验本身可能的失误。可以检测一下短时间成球后的细胞maker（不过，时间长短应该没有什么差异，个人觉得时间长点也许更好些），再者就是i，所用的maker不合适。

jack0811

或者楼主可以试下把贴壁培养细胞用marker分选之后悬浮培养看这样出来的球囊表达几个marker的情况?