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楼主: huangcong1988
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慢病毒感染细胞   [复制链接]

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发表于 2012-4-11 08:44 |只看该作者
回复 daviddow 的帖子
+ H" G/ }: m6 _3 f+ W& h/ Z
/ q* y2 b2 V( `$ S9 r非常感谢

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发表于 2012-4-11 08:44 |只看该作者
回复 yuheng 的帖子; D7 h( U7 [+ U2 I
! [5 N/ o- ]6 F* a" ?7 r0 z
谢谢

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发表于 2012-4-11 10:46 |只看该作者
2008年,In-Hyun Park等人发表在Nature protocols 上的题为“Generation of human-induced pluripotent stem cells ”的文章中,在第44步中提到,加入MOI为5 的OSKM病毒和MOI为1的hTERT和SV40 LT,你也可以参考一下~
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发表于 2012-4-11 14:46 |只看该作者
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回复 shihuijunm 的帖子4 I  {+ x7 t6 M9 L5 W
/ V& T! u4 E/ V$ Q) n
谢谢你。我的质粒是不带荧光的,我用定量测定滴度(最后单位是:单位体积里面病毒颗粒数),不是MOI这个指数,所以我只能按照病毒数与细胞数比例做感染,有什么办法能转换MOI这个指数跟我的滴度单位吗?还有,如果要买带荧光的质粒,在哪里买呢?是addgene吗?准备换质粒,我这个质粒系统太落后了
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发表于 2012-4-11 16:48 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子% H( x9 j. [% M9 `8 I  V% o& R

  a" T' Z9 Q5 I4 s: @0 t5 t 病毒滴度怎么定量测的?ELISA?
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发表于 2012-4-11 22:18 |只看该作者
回复 rexhz 的帖子
- s# N. O, I& ?; i& c1 P
9 r/ i/ W  O% ~. {0 `没,我用定量测的,所以不算准确,但是基本能反应问题(提RNA,反转录,定量,有些RNA没提出来,但是也有些病毒没有感染活性),这个办法很费时费力,但没办法,不带荧光,只能这么苦逼啊
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发表于 2012-4-11 22:56 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子$ t, D% \3 o8 {
$ ~3 o$ s( e8 M( K. N: V1 M  q
还是提早换质粒吧,没有报告基因的慢病毒不好做
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发表于 2012-4-12 08:43 |只看该作者
回复 rexhz 的帖子) }( V9 J6 J4 T  t* s$ J" h

: @, v6 `/ y2 ]3 _: t/ G; _恩,准备换呢,如果要买带荧光的质粒,在哪里买呢?是addgene吗?

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发表于 2012-4-12 09:43 |只看该作者
回复 yuheng 的帖子
4 D  Y$ A% `* [# u  f
7 `& B7 I  ]5 o5 z您好,您也是做慢病毒感染脐带间充质干细胞的吗?您说的MOI值有参考文献吗?

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发表于 2012-4-12 13:45 |只看该作者
自己摸索的一些经验。
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