养细胞的一些疑问

myrudy

你的T25瓶盖上没有滤膜的话，瓶盖起码要拧松到可以抽动为止，只要瓶盖掉不下来。宁外，你的培养基配制的时间，建议每次配制2周内使用的量，也可能是培养基系统的缓冲能力下降。/ K  y6 R' V. s! J. m
你的细胞建议做个支原体检测，看是否存在支原体污染的可能性。

huangcong1988

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滤膜？神马东西？corning瓶里有么？

huangcong1988

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) T' V( ?: q# F1 n% N% ]) O$ Q2 A7 v, ~  H; A# X: o* [6 g
培养基我基本都是两周内用完，但是T25瓶盖有没有滤膜我不太清楚，corning的，那种橙色瓶盖的，不知道有木有

b6122

我印象之中，康宁有没有滤膜的T75价格都差不多。& }5 v! Y: X; l  r7 L
你看看你的盖子，是不是全部都是塑料，上面没有明显的孔，如果没有的话，就是没有滤膜，你养细胞的时候就不能拧紧了，否则不通气。有滤膜的盖子一眼就能看出来，瓶盖上有孔，盖子里面反过来可以看到一个白色的膜，是0.22um的滤膜。

receiver1

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2 t) U, z; c' |4 Q2 L$ `5 Q' @; Q漂浮的细胞很多说明你的培养条件不好，细胞死了才会飘起来。
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/ ?  e! o  E& s2 _3 k" D成纤维细胞是很好养的。我用的配方：高糖DMEM（Hyclone, 货号SH30022.01B，很便宜，大约50元/瓶500ml）+10%胎牛血清，1X双抗。) x) @3 h5 b  p0 T/ Q
0 @4 a# P- s% k9 I$ n/ @  a
如果还养不好，估计是你血清不好，或者培养箱有问题。) d: i# k3 {/ I7 W  s+ C/ z, z7 b0 X

1 L$ r' C6 {" p% }补充内容 (2012-4-24 11:58):
' F# c0 r3 y5 z5 g漂浮的那些圆圆的、亮亮的都是死细胞。

chentian820

其实你的问题都是一些很常识性的问题，养好了，一切ok；养不好，感觉什么都有问题。
! D) g  A/ L( p- E8 R其实记住三条：1，良好的实验习惯，包括你同实验室的；2，细胞的种子一定要好；3不要想着省钱

b6122

其实我反而觉得他的问题是瓶盖的问题。我曾经用过没有滤膜的盖子，拧紧了，过两天去看，有一半的漂起来了。后来我坚决不用没有滤膜的盖子了。

myrudy

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估计你用的是没有滤膜的，有滤膜的瓶盖很好认，你看一下康宁培养瓶的一整包的外包装，有瓶盖的不同规格。

myrudy

回复 huangcong1988 的帖子* w! R2 J6 s8 W) G/ ~
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4 n$ i" f( q" h  A3 |
上面这个图，就是有滤膜的盖子。

myrudy

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+ {1 `+ X* v& D( F: Q; J- ]3 H. l% v2 ^( S& R
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这个是没有滤膜的瓶盖，很好认。这个在培养过程中，如果细胞有二氧化碳的浓度要求 ，那就需要拧松瓶盖。