养细胞的一些疑问

myrudy

你的T25瓶盖上没有滤膜的话，瓶盖起码要拧松到可以抽动为止，只要瓶盖掉不下来。宁外，你的培养基配制的时间，建议每次配制2周内使用的量，也可能是培养基系统的缓冲能力下降。
0 i+ f# ^6 W6 |( v你的细胞建议做个支原体检测，看是否存在支原体污染的可能性。

huangcong1988

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/ y7 s" r! E$ e. D
" Q/ |! z% U- V! K. ?' L: ]; O滤膜？神马东西？corning瓶里有么？

huangcong1988

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+ V) V; O, U& Z. d
9 V, j0 m6 J$ |6 s% `2 Y9 V2 V; Z# }. C培养基我基本都是两周内用完，但是T25瓶盖有没有滤膜我不太清楚，corning的，那种橙色瓶盖的，不知道有木有

b6122

我印象之中，康宁有没有滤膜的T75价格都差不多。7 l" ]# f8 @- J1 b( v
你看看你的盖子，是不是全部都是塑料，上面没有明显的孔，如果没有的话，就是没有滤膜，你养细胞的时候就不能拧紧了，否则不通气。有滤膜的盖子一眼就能看出来，瓶盖上有孔，盖子里面反过来可以看到一个白色的膜，是0.22um的滤膜。

receiver1

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2 R( X/ _+ u0 n$ ]! p4 y
6 R2 z/ u! e# i5 T. o; t! A( O. v漂浮的细胞很多说明你的培养条件不好，细胞死了才会飘起来。
( {2 N3 F# X) \) p0 w! t: @
; H! |' D5 N, ]6 D/ G成纤维细胞是很好养的。我用的配方：高糖DMEM（Hyclone, 货号SH30022.01B，很便宜，大约50元/瓶500ml）+10%胎牛血清，1X双抗。
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6 L6 u, x+ F: _4 ?如果还养不好，估计是你血清不好，或者培养箱有问题。% r, b& J% c& M

% v- m! w2 x- A. ]2 m补充内容 (2012-4-24 11:58):. C" |- R6 }( P  t# M
漂浮的那些圆圆的、亮亮的都是死细胞。

chentian820

其实你的问题都是一些很常识性的问题，养好了，一切ok；养不好，感觉什么都有问题。; c  u$ j( E1 R7 H$ n
其实记住三条：1，良好的实验习惯，包括你同实验室的；2，细胞的种子一定要好；3不要想着省钱

b6122

其实我反而觉得他的问题是瓶盖的问题。我曾经用过没有滤膜的盖子，拧紧了，过两天去看，有一半的漂起来了。后来我坚决不用没有滤膜的盖子了。

myrudy

回复 huangcong1988 的帖子& [5 i2 V5 F( }+ C  S0 H

1 n1 Q# t- X6 ~7 }估计你用的是没有滤膜的，有滤膜的瓶盖很好认，你看一下康宁培养瓶的一整包的外包装，有瓶盖的不同规格。

myrudy

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7 O9 {& }7 O8 a% \* c; m3 g  U7 L' X2 b4 x" p

1 E( D( a! y4 h2 d( t上面这个图，就是有滤膜的盖子。

myrudy

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& w4 B2 _' g% m+ N3 D9 c这个是没有滤膜的瓶盖，很好认。这个在培养过程中，如果细胞有二氧化碳的浓度要求 ，那就需要拧松瓶盖。