求解：做个PCR水里边老老是P出东西?

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最近不知道怎么回事？  做个PCR老是P出东西来  已经很小心了  就是严格实验操作  尽可能避免污染机会  可是还是出来东西！！" f6 K3 {4 B, L7 U

5 q) n* |, t* B( K# B难道是其中某个试剂如水，或者引物等...   求解！！~~   谢谢

arniekyo

建议您将引物，buffer，酶等PCR试剂都用新的做一次

genedu

是酶的问题，假如您用的是国产的酶，它有可能是在具有一定抗性的大肠杆菌中提取的，那你的酶中也就含有这个东东，当你不幸要P这个片段时，悲剧就发上了

ouyi2738

引物，buffer，dNTP，mg2+，水都有可能被污染，想找原因就一个一个试吧，不想找就全换新的。

linzi214

我们这边也有人从水里面扩出来东东，可以买天根公司的或者酶自带的DNase-/RNase-free ddH2O，如果还有东西扩出来，可以测序看是不是你要的目的条带，是的话可以回收纯化你的目的片段；不行的话更换一支新的酶，其实你操作这么小心的话，酶和buffer应该不会被污染的。

chentian820

我以前也碰到过。我们实验室是做病毒的，有一段时间我从水里也能p出条带。
, v5 `8 D7 Q) N) x2 f* m/ h我就换了一个实验室，然后用别人的水，就好了。

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回复 chentian820 的帖子7 c: K$ [4 T/ Y! L
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en 确实是气溶胶的问题 换了间实验室再做好了  谢谢提供建议

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回复 linzi214 的帖子$ R6 L: g; _2 A/ z- ^! q7 n

9 X) f7 k; v- ]  v- x; c( B嗯 谢谢提供宝贵建议  非常感谢

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回复 arniekyo 的帖子( v! N$ X1 z/ \" ]4 J3 P
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嗯 是气溶胶的缘故  它造成了污染

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Thank you ! 找到问题症结了  谢谢