求助为什么我养出来的CIK细胞集落大部分贴在壁上啊，急！

我是丁香

做了上千份外周血CIK，顽固贴壁的遇到过2-3次，贴壁倾向的遇到过几十次把，原因不知道。

yanlu98

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请问你的血清比例是加多少啊？

花饶然

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自体血浆用10%，起初很必要的，由于血浆不多，中后期就没得加了，不过对CIK细胞没有太大影响了

花饶然

回复 我是丁香 的帖子# k3 p. U3 `; Y! U! l, q
0 A2 }- c) s0 C9 N8 v
请问大侠做过脐血诱导CIK没有啊？另外，CIK细胞老化的标志，以及原因有哪些啊，盼赐教！

我是丁香

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9 I, Q2 n% a& y6 l: `; _7 A0 l$ k: Z/ B9 C( k
抱歉，么有经验

Demon_CN

学习
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wagumaxida

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5 v9 v' R( {& r1 i, R因子加的不够或者不对是有可能贴壁的

long3390hai

我培养的细胞也是这种情况，第五天的时候发现贴壁很多，细胞呈长条状，之前的细胞这种情况很少，最近一批出现的很多都是这种情况，我想知道这是什么原因，是不是跟因子有关？/ e! L8 w. u/ }0 U* {$ t

细胞海洋

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# t  T/ o' }% j3 S# C$ p$ H
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3254938

我们培养的外周血CIK没有出现集落贴壁现象，我们的方法是：抽取外周血50ml,用ficoal分离并收集PBMC,因为是临床用的，我们都是用生理盐水冲洗的，然后以1 ×106 /ml密度，用GT-T551,加入IFN - γ1000u /ml, 24h后加入 IL - 2 1000u /ml, CD3 50ng/ml,CO2培养箱中常规条件培养,以后隔天计数换液同时补加rh IL - 2 1000u /ml，一般培养14d-18d，回输前两天做内毒素，真菌，支原体，细菌检测，流式做表型等，细胞总数一般能达到2.0.X1010,收集最好只离心一次，做个存活率，一般在90%左右，分四次回输。仅供参考，谢谢！