大鼠骨髓间充质干细胞培养，生长因子

cavalior

养大鼠骨髓间充质干细胞2、3个月，一直养不好，P2开始老化。看到有些文献说要加bFGF、EGF，不知道各位有没有经验可以分享下啊，谢谢啊！！！
- @" N. |- p" L6 }我现在是用的Gbico 的FBS 10%，DMEM/F12 ，另外还加了丙酮酸钠、2-巯基乙醇，但还是养不好。哎，急死了哎，这实验一直没法往下做。

luoziwei

应该是没提好吧。

liuyul03

个人认为，干细胞的原代培养很关键，如果原代培养做不好，细胞传不了几代就不行了。

cavalior

回复 luoziwei 的帖子# p0 I0 r+ F5 V& h3 j# r  y4 G. s9 z- T
  H% t; a0 x- o/ M# F, o0 o/ x
您提的PO的时候细胞是什么样子的啊？能否上图给我借鉴下啊，这是我的P0第五天，细胞看起来和p0第二天的时候已经不一样了

cavalior

; M7 q) d. x% f# \- @" q7 k
P0,第五天
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P0,第五天& Z  C- E$ ?0 m8 s* e$ t# A7 K

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doctorqingbin

感觉是污染了，一定要彻底清理clean bench.

cavalior

回复 doctorqingbin 的帖子. y# F# R! {! o  s* ?. l

; Q/ r. @  d% V( `不会吧，看细胞长的速度还可以啊，就是这个形态。都不知道有没有必要做流式来鉴定下。高手来帮忙啊。

luoziwei

回复 cavalior 的帖子
1 u' j! W3 c8 S2 G) h1 ?- Q/ I% Y. \0 w- H7 @
这是我P0第7天的。

2012-4-28 22:22 上传

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frankieisme

不像是污染了！ P0的细胞形态非常好，传代之后不好的原因我推测一下，可能是消化的问题！你胰酶的浓度和消化的时间？一般来讲用０．０５％的胰酶消化，时间大概５分钟作用。细胞一般不超过１０代，最好在第４、５代用于实验。

cochongg

感觉背景好不干净，细胞状态也不怎样，，原代千万要状态好" O, i; g3 d/ a