今天丝裂霉素处理MEF出现了问题，谁能告诉我啊

frankieisme

, `4 f3 |1 Q" @1 j) p- }
. `9 X7 n* R4 BPBS洗3次,加胰酶消化,镜下观察大细胞间隙出现,细胞稍稍变圆就终止消化,计数种板.为什么不按标准的protocol做,一般情况下还是不需要随意更改protocol.

zhusealin

我们也是处理完洗5遍，细胞也挺正常的。主要应该还是消化的问题

huangcong1988

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4 b" ^. ^( x1 ^; q" }
6 `  @5 c6 D& V2 Q$ o' X) D1.5ml
2 t) v" L. t9 n' `" W胰酶？1.5ml是不是多了点？个人觉得你量的三分之一就够了，胰酶哪有用那么多的啊？

huangcong1988

我试过用洗两次，就洗两次，效果也行，不过洗5次可能还是多了点

receiver1

MMC处理的时间是合适的，PBS洗几遍都没多大问题。问题肯定出在你的胰酶消化这一步上！

myrudy

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! Q4 P6 r* Z0 i( a8 n1 |/ E. ]7 S& G" {* W! |
洗一遍的话，丝裂霉素的残留量会较多，对细胞伤害较大。

YYQ6301

丝裂霉素的浓度没有弄错吧？应该是消化过度了

shangchunhua

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" p& Z8 L1 z. M& u2 \
  g6 }3 C$ s, R, m9 sPBS是预热的吗？

chenchunlei

操作版本怎么这么多啊

前途似锦

回复 抹了个茶 的帖子" t  n: S% X9 ~+ ?

/ Y# u! z- q0 C# W这。。。。。。。。不要误导小朋友啊，呵呵