关于DC-CIK共培养

yanlu98

给位前辈，我想向大家请教一下一般DC在培养后第几天和CIK共培养，共培养时怎么收集DC，我看到以前的帖子，有前辈说用冷盐水冲，为什么要用冷盐水呢，那是多少度的盐水？而且用盐水冲过了之后要离心再把细胞收集起来移到CIK里面吗？希望各位前辈不吝赐教，越详细越好啊！

大少爷

DC细胞培养第六天/第七天，在显微镜下观察细胞，细胞变为毛刺状悬浮细胞，终止培养。
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3 `' u" j1 V$ kDC细胞收集：将贴壁细胞培养瓶中的培养液混匀后，转移至50 ml（或250 ml）无菌离心管，
6 [$ G- i% V  }/ m( B  {立即向培养瓶加入10ml 4℃预冷的生理盐水，迅速晃动和吹打，立即移至离心管，重复上述步骤，# c/ M0 O  g5 H! T
直至在倒置显微镜下观察，绝大多数为贴壁紧密的细长梭形细胞为止。4 q! X$ f" K; B+ ?- Y
将收集好的DC悬液离心（300g，12min，RT）弃上清，用移液管加生理盐水将细胞液稀释，" T' r9 u! t- K& h% v4 F: D
混匀，离心，上清去掉，用培养基重悬细胞，加入悬浮培养细胞中与悬浮细胞共同培养。
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1 R$ Y' t$ d: Q+ y( S  F5 A冷盐水刺激DC细胞收缩，便于从培养瓶上脱落，也容易吹打下来。不能用细胞刮刀或细胞消化液，对细胞损伤太大。

yanlu98

回复 大少爷 的帖子, d8 h& w" c6 r7 F  y2 p( b. i

# u; G; y2 g9 s0 a6 k7 C' h非常感谢大少爷！！

yanlu98

回复 大少爷 的帖子" m2 k4 R6 y2 P1 F

$ c  H1 u' \9 L0 T8 t还想问一下大少爷 你说的“直至在倒置显微镜下观察，绝大多数为贴壁紧密的细长梭形细胞为止”，那剩下的梭型细胞是什么呢？还想麻烦你能不能发几张你养的DC给我学习学习呢？

yanlu98

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0 o9 v$ w3 }' _) O; T4 G! s
1 h# ?# Y0 P0 t/ t) U$ c4 o还想请教一下大少爷，用冰生理盐水冲就是为了让细胞收缩，那我直接用4度的1640冲，冲完了直接加进CIK里，就不离心了，可以吗？

大少爷

我没试过,不知道效果怎么样,你可以试,然后告诉我效果,
5 i& E' h" s; V, I8 h你真聪明

大少爷

我没试过,不知道效果怎么样,你可以试,然后告诉我效果,
% b$ Y6 Y: x: W5 b/ J1 W你真聪明