gFAP 染色

dianying

gFAP 染色：有没有用 BSA 封闭染色染得漂亮的，大家用PBS还是TBS呀？
: P" B: v, _& A  W' n5 l5 z谢谢！

Yedan

我做immunostaning全是用10%FBS封闭的……

dianying

回复 Yedan 的帖子) `3 s# c6 [1 v5 H) K" O

: e  m$ @# k8 F! @' V' h: }谢谢你！& [" u+ ]6 r: B/ J3 v! S
于我封闭没问题，我只是想知道简单短时的gFAP染色大家常用tbs还是 pbs去洗。

Yedan

( h3 _" j2 J8 g, E. E
% r+ e0 z& O8 i  F, n回复 dianying 的帖子( z1 A) f% s# V( d+ z) Y" n/ r! d7 R

% H0 a' R8 O' C* f, b5 `洗的时候不就是用封闭液去洗么，二抗完了染核的时候用PBS就行了

dianying

回复 Yedan 的帖子6 ^5 `7 T6 S% ]& P: _; ~8 y

, a% [3 g1 z9 l- g1 H: B第一次听说用封闭液去洗 ，可能是我孤陋寡闻了。

dianying

回复 Yedan 的帖子1 K. d/ J( P; a

, k# _1 t( b: G" Z- |7 X看来你的方法比较传统，染核现在大家普遍用Mounting Medium with DAPI， 除非你的核很难出来。

Yedan

回复 dianying 的帖子. Q% _! W2 Q$ S( X, n6 l, ]
- R5 @0 V4 U, W% Y/ Q$ C
染色不用封闭液去洗，难道用什么？封闭为了防止非特异性产生，你用PBS或者别的什么把BSA/IGG洗掉了，那不是白封闭了？染核……PBS+核染料就够了，没那么复杂，mES/hES都这样

dianying

回复 Yedan 的帖子  E3 F3 J5 O! {# r* \" q" l
' a$ e, o4 M6 k  ~
那你有没有染过gFAP？表达的如何？可以分享吗？

Yedan

你要什么细胞的mES/iPS EB分化的么 hES的我做的neuron的 没GFAP只有nestin

dianying

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' @* {, A$ }( T, \- g
( S8 I, b, @$ ~我想看看标神经元和胶质细胞加DAPI三标。