DC-CIK细胞培养出现的问题 - 免疫细胞治疗专区干细胞之家



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mlljiayou123

新手上路

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楼主

发表于 2012-6-13 16:57 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

DC-CIK细胞培养，显微镜观察时有很多的血小板，这些血小板怎么样能处理掉？怎么样能避免有血小板呀？谢谢各位前辈了！

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沙发

发表于 2012-6-13 17:05 |只看该作者

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大少爷

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藤椅

发表于 2012-6-14 00:05 |只看该作者

既然已经在培养了，血小板就没法除去了，对细胞影响不是很大。2 q9 S# Z" F& S( K
下次分离的血的时候，吸出的白膜层细胞多洗涤几次，降低离心力。( T/ A ^* d _9 A6 l* p

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apai2003

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板凳

发表于 2012-6-14 09:15 |只看该作者

收集白膜层后加生理盐水稀释，第一遍高速离心尽量将所有细胞离心下来（因为混有Ficoll导致液体比重增高，细胞不易离心下来）；后面采用低速离心将血小板等杂质洗涤干净（因为血小板等杂质比重比PBMC轻），观察到离心后的上清比较清澈基本上就可以了。

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gengtongyu521

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报纸

发表于 2012-6-19 11:35 |只看该作者

一般1200rpm，离心8min，就可以了。

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wagumaxida

版主

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地板

发表于 2012-6-19 16:18 |只看该作者

用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞的时候梯度离心，2000rpm（大概400G）20min取白膜层，1500rpm×8min---1200rpm×6min---1000rpm×5min，中途用生理盐水或pbs洗，最后用培养液洗，这样血小板就会少很多

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