临床上检测外周血内皮祖细胞的问题

ljlzx153019

向各位大侠请教数个疑惑：
: p9 O- P4 s# p  H- q5 M# I      1. 内皮祖细胞的测定在临床上可行吗？0 J% T1 b* g  l
      2.我想了解用药前后的内皮祖细胞数量的变化。开始是抽取患者2ml的外周血用流式细胞仪检测，可是用药后的内皮祖细胞浓度反而下降，不知什么问题？应该是上升才对呀？！是试验设计有问题吗？1 S3 T2 l6 i0 T7 J% k9 }/ W! K
     3.我看见也有前辈提出类似问题，回答是用细胞计数板计数。那抽取外周血后要进行相关培养吗？1 T, H& U; M$ y2 \) R
     

pailishi

内皮祖细胞你是用的什么标志物检测的？CD133+/CD34+?目前好像没有特异性的表面标志来分选啊

穿越地平线

可以的，用流式鉴定CD34+KDR

穿越地平线

这是技术问题，不是实验设计问题，前提是你是动员EPC的药物，我只用1ML就可以了。

穿越地平线

找个好的技术员老师你的问题就解决了

xyzin

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: I) _8 D( y+ E5 r& v最近在做EPC动员检测，有些疑问请教：1、动员剂用什么比较合适？2、用什么指标评价EPC增加更客观？3、小鼠检测有很多指标，我用Sca-1和FLK-1双标记检测，有无其他更好的检测标记？谢谢！

细胞海洋

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almasun

如果是用外周血培养EPC克隆，1ml外周血中只能得到0－2个左右。这种比例怎么用流式检测啊？我觉得动员后培养比流式靠谱。

PercyLaw

也不是的，动员剂具体不大知道，虽然EPC数量是少的，但是并没有那么少，流式检测应该够用了。测epc变化不应该培养之后再检测，因为培养皿、培养条件、以及接种细胞时操作的因素多多少少会影响细胞的数量，所以如果真的培养，那么得到的epc数量也是培养后的数量，不能够有力地证明数量的变化。! D1 \' \$ C8 d( z8 {5 y8 A- y  z1 p
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PercyLaw

回复 xyzin 的帖子+ j0 \! s( X; v% Y
' t6 O0 R! V( I
如果一定要做培养，可以用一些方法使得epc数量增加后再培养。比如，抽取30ml的外周血，然后再用Ficoll分离。然后操作的过程中尽量减少细胞的丢失。