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楼主: 573639471
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hiPS传代时的消化问题   [复制链接]

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包包
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发表于 2012-6-23 17:12 |只看该作者
如果iPS消化的时间比较长还下不来,就有可能是分化了。
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发表于 2012-6-24 08:49 |只看该作者
回复 fguw 的帖子
: F  @' N. U* j
/ O4 C" m7 b3 x! I, S) t" f用PBS配的

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发表于 2012-6-24 08:50 |只看该作者
回复 zmm 的帖子) h% d3 t# ~3 b4 B) j
  }' |3 f& z; G$ Z; F8 f
iPS是人的,feeder 是鼠的

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发表于 2012-6-24 08:50 |只看该作者
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回复 BNJN 的帖子
$ j7 O' j' \8 d
; u* e# W, ]6 J3 ]% B6 ?不会吹散吗

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发表于 2012-6-24 08:52 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子
; Y3 V# A: U, o# e. X: s3 m6 {8 P, q
你买的是哪公司的? 好用吗 用DMEM/F12配的?

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发表于 2012-6-25 08:56 |只看该作者
Gibco的,我实验室的hiPS、hESC传代都用,5min后看见克隆边缘有卷起就行了
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发表于 2012-6-26 08:42 |只看该作者
回复 573639471 的帖子1 a: i0 G& _( h8 \; l+ [
. U2 i+ Z/ s" b" }" M
Gibco的,具体与楼上BNJN相同。
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发表于 2012-6-26 14:57 |只看该作者
回复 fguw 的帖子9 N) p1 D) `! B: f8 c+ g
9 z- j; E7 L' n/ {0 O
配的有什么问题?除了不应该用PBS还有吗
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发表于 2012-6-27 15:35 |只看该作者
比较标准的是,DMEM/F12(1:1)
7 I( \9 d1 \4 j8 v* X. i% q" H因为基础培养基就是这个,
# C2 a+ E# g9 `9 l/ j4 e2 ~我们实验室做过实验,发现这个最好,
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发表于 2012-8-10 16:16 |只看该作者
       feeder太密了!iPS克隆中间的细胞好像已经有分化了吧,这可能也是iPS克隆消化不下来并且细胞较散的原因吧。
3 M# R( b! t8 P; G7 y    我们用胶原酶消化一般40-50分钟至iPS克隆明显卷边,即使克隆完全消化下来了细胞也不会像图中的那样散。/ w# Q( f: Z+ B% j6 G" J7 z8 K
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