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请教MSC成骨分化时细胞凋亡了,原因会是? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-6-24 23:26 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
小弟的软骨MSC做成骨甩软骨分时,总是进行2周时。细胞全部凋亡了,剩下棉絮状物质,可以肯定不会是诱导生成的东西吧。ALCIAN染色什么都没有,请问是有这方面经验的介绍会是什么原因啊。用的GIBIO的合成的诱导液。没有加其它成分。
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沙发
发表于 2012-6-25 08:29 |只看该作者
估计是你那诱导液的问题,对细胞的刺激强度太大了,细胞忍受不住导致凋亡。可以改变一下诱导液的浓度看看。
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藤椅
发表于 2012-6-25 09:13 |只看该作者
我们用的也是gibico诱导培养液,很容易将MSC诱导成骨和脂肪细胞,效果很好。我们是在孔板里做的,会出现少量棉絮状物质主要是孔板里部分地方细胞密度大,此外你的细胞没染上颜色,跟你配置的茜素红浓度、pH、是否过滤也有关系。
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板凳
发表于 2012-6-25 10:35 |只看该作者
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回复 liluli0715 的帖子
2 Z* T) }4 E2 x" H1 Y/ _5 N7 U! [
请教下高手成脂分化大概几天看到的表型变化,有其他需要注意的地方吗?能不能分享下诱导液配方~ 谢谢啦~~~~~
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报纸
发表于 2012-6-26 11:07 |只看该作者
我们做成骨、脂肪分化都用的是两星期,有很多文献上成骨是三个星期,你买的是gibico分化试剂盒是吧?你就按照说明书上来,就没问题。关键是你在孔板里接种细胞要均匀,然后是油红O要过滤,临用前3:2稀释后再过滤,效果很好
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地板
发表于 2012-6-27 22:04 |只看该作者
光镜下,可以肯定培养皿里面没有看到细胞了,看到提细胞干枯了似的,接着就碎裂了,GIBIO合成液,不用自己加什么成分啊,经验丰富的师兄,我可否加地塞米松进去??
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发表于 2012-7-4 12:46 |只看该作者
请问您们在诱导第七天和第14天的成脂细胞是什么样的,可以发一张图吗,我在诱导中怎么培养基上总会飘一层像脂肪的棉花团,如果是成脂细胞破裂了请问如何维持
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小小研究员

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发表于 2012-7-5 00:50 |只看该作者
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