我刚刚接触DC-CIK，有一些不明白的地方，请教一下群里面的大神，谢谢

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我刚刚接触DC-CIK，有一些不明白的地方，请教一下群里面的大神，谢谢
# n1 A# y, a% f1.培养基的使用，我们实验室以前一直使用DMEM培养间充质的，我查文献上面说养PBSC需要用1640培养基，请问用DMEM可以替代吗？两者培养对PBSC影响大吗？
9 m' Y- J7 \6 R5 I, G$ J* a2.我前天提的PBSC（外周血单个核细胞），放在直径100mm培养皿里面培养，48H后换液观察发现有一些点状贴壁，请问一下PBSC贴壁是不是也像间充质干细胞一样一开始呈现梭形，谢谢！

wagumaxida

113305060 发表于 2012-7-5 09:03
$ }: k7 }* ?+ x+ z我刚刚接触DC-CIK，有一些不明白的地方，请教一下群里面的大神，谢谢8 N$ F9 z; u( u; d- X# }$ s
1.培养基的使用，我们实验室以前一 ...

* L' x7 C' I' O* G  n9 a! R纠正一下 不是“PBSC”，是“PBMC”! R5 A. [2 q# \, E4 }4 o. w% A3 r
1.尽量不要替代，要替代也要用类似的培养基，比如DC培养基，AIM-V等，影响比较大& n' x  W0 w# c" y
2.呈现贴壁梭形很可能是巨噬细胞

113305060

回复 wagumaxida 的帖子8 q+ ^2 i1 R" c
9 e8 z! r* ]+ I' n' c
我看文献上说提取的白膜层细胞后于细胞培养皿培养2H后，悬浮细胞用作培养CIK，贴壁细胞用作培养DC，请问一下这个时候的悬浮细胞和贴壁细胞分别是什么细胞，谢谢

大少爷

外周血单个核细胞，细胞培养皿培养2H后，悬浮细胞主要是淋巴细胞，贴壁细胞主要是单核细胞。
5 ]6 o6 l) _- u8 L. Y/ S6 `7 J3 Q! A$ R/ L9 P: Q2 O7 W
贴壁后的长梭形细胞是主要是巨噬细胞，不是DC细胞。

lazyworm

1640一般是用来培养肿瘤细胞的。分离出的PBMC包括淋巴细胞和单核细胞，单核细胞要经过细胞因子的诱导才能成为DC（树突状细胞）。

113305060

回复 大少爷 的帖子) B# ~; h# u& _& S; \/ C, {- Y: S; [
& R, c' l3 x4 p: t2 c
请问一下贴壁的单核细胞贴壁的时候是什么形态，谢谢

大少爷

圆的，诱导成DC之前不好分辨，四五天的时候细胞周围会有毛刺。

deshenglll

学习

deshenglll

学习

wwxx66

学习一下！1640最初设计是用来悬浮培养淋巴细胞的，一般不能代替使用。贴壁的CIK 长三天成大的集落就自己浮起来了。