UBMC复苏产生絮状沉淀的处理

lixuejia

絮状沉淀，过滤掉了，加磁珠孵育后，再次出现。纠结中。。。。。。

ldhdunhe

不知道楼主的冻存前方案如何，前面加一步絮凝除去红细胞如何?另外血浆本身冻存复苏后会有絮凝物，冻存液不妨换换

lixuejia

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5 ?* w9 c+ Q: V, N; ^8 @絮凝除去红细胞，如何操作？我们尝试过红细胞裂解，红细胞裂解了，但是裂解后的产物很难从UBMC中除掉，结果复苏时，产生沉淀反而更多。

lixuejia

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+ g- ?$ s/ E, b2 N, ]6 ^' U0 Q絮凝除去红细胞，如何操作？我们尝试过红细胞裂解，红细胞裂解了，但是裂解后的产物很难从UBMC中除掉，结果复苏时，产生沉淀反而更多。

pengxuleo

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) K* B0 F8 t9 l9 v- [; t这个问题我也遇到过，我们认为的原因和你们的相近，你们用的方法我们也都用过，当然也过滤过，并不是很理想。
- M" Q" E9 a2 `. L2 R我们尝试过降低冻存是MNC的浓度，解冻时会好一些，你可以试试看

lixuejia

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9 ~& p6 P5 _9 g根据文献查阅，冻存UBMC的数量在2*108/mi以下都是可以的，但大部分文献中冻存UBMC都在500万~5000万/ml，我们目前冻存UBMC的数量一般在2000万~5000万/ml，感觉差异不大。不知道你们冻存的UBMC的浓度是多少?如果浓度太低，操作起来就比较繁琐（一个样品要懂好多管，占空间也大）。请指点，谢谢！

pengxuleo

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( m. i7 N$ [' q( [' b" X+ M  L' |1 Q! x: ^- l" {! X4 a1 Q6 o% ?* M
我们冻存的浓度在1x10E7/ml左右，沉淀还是有的，6 q/ {- A4 b# w" ?5 G
如果梯度离心的时候分离的MNC中红细胞少些的话就会好些的
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