UBMC复苏产生絮状沉淀的处理

lixuejia

絮状沉淀，过滤掉了，加磁珠孵育后，再次出现。纠结中。。。。。。

ldhdunhe

不知道楼主的冻存前方案如何，前面加一步絮凝除去红细胞如何?另外血浆本身冻存复苏后会有絮凝物，冻存液不妨换换

lixuejia

回复 lixuejia 的帖子, i1 u/ L4 e9 g! h+ }+ {# B
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絮凝除去红细胞，如何操作？我们尝试过红细胞裂解，红细胞裂解了，但是裂解后的产物很难从UBMC中除掉，结果复苏时，产生沉淀反而更多。

lixuejia

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  t2 e/ H7 h7 o/ n/ R/ K
+ v" Q2 o/ v7 R2 b2 V. K2 X絮凝除去红细胞，如何操作？我们尝试过红细胞裂解，红细胞裂解了，但是裂解后的产物很难从UBMC中除掉，结果复苏时，产生沉淀反而更多。

pengxuleo

回复 lixuejia 的帖子* n( j$ }1 f" X& d7 X" F- Q

9 B+ v+ l& q, V" E3 \* F, `这个问题我也遇到过，我们认为的原因和你们的相近，你们用的方法我们也都用过，当然也过滤过，并不是很理想。0 ?6 ~1 x* m" c6 ^
我们尝试过降低冻存是MNC的浓度，解冻时会好一些，你可以试试看

lixuejia

回复 pengxuleo 的帖子4 O$ r  B. A! t" ?% }
2 N+ g, a  O- n5 i9 A
根据文献查阅，冻存UBMC的数量在2*108/mi以下都是可以的，但大部分文献中冻存UBMC都在500万~5000万/ml，我们目前冻存UBMC的数量一般在2000万~5000万/ml，感觉差异不大。不知道你们冻存的UBMC的浓度是多少?如果浓度太低，操作起来就比较繁琐（一个样品要懂好多管，占空间也大）。请指点，谢谢！

pengxuleo

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# h. x- y6 n  e0 W% m我们冻存的浓度在1x10E7/ml左右，沉淀还是有的，5 L( _0 @8 p" r0 c& T0 V7 U0 m) d/ I
如果梯度离心的时候分离的MNC中红细胞少些的话就会好些的9 n. t% I# b; |+ c. T& ~