荧光原位杂交（fish）探针设计原则和方法

xxp1246087085

谢谢大家，这两天忙考试了，没上网，非常感谢

hn1022

我也要做胚胎的RNA FISH ，想请教一下protocol呀！谢谢

l19rna

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; z( k7 e% t6 g/ X9 i' z6 B5 {
1 K; Y  u3 a! \4 a9 |. I. L& o不同天数的胚胎的ptotocol会有细节上的差别，我做的比较早期，建议参考nature protocol上的文章：
; g+ G4 P+ M) x) }+ Z! a) b. tTitle：An optimized procedure for whole-mount in situ hybridization on mouse embryos and embryoid bodies3 ^, ?- |3 i* c( }

无心

无心

想了解

icebaby

做ISH，最常用的还是Riboprobe吧？我想FISH也应该是这样的。我最近要做ISH，探针的话想找个公司来做。

doctorrobin

我想请教一下想做一个对照内参探针找什么基因比较好 本人刚接触ish

细胞海洋

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5 ?. A; \1 S5 Z: x% J! F$ X% ?* \  D# l% u8 j7 P* P
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l19rna

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7 Z2 [2 j4 q+ a5 p  w4 x# S- \
6 n$ D; t% n9 h+ d- \* D# W' ?我一般是用别人已经发表的探针，而且其表达谱是公认的，才用来做阳性对照；
: _3 c9 J6 |. s, J0 \+ g- g阴性对照就选择cRNA的互补序列，这个在你的cRNA载体上转录出来就行。

l19rna

回复 icebaby 的帖子3 B; i4 H; z" f% e8 d. F* i
6 ~. T$ I  d1 a8 W, L! V1 k0 `0 {
FISH已经有很多更高效的方法。尤其是做单细胞且定量的FISH。其探针也有很多种，除了传统的，还有50bp长度，19-24bp长度探针，等等