荧光原位杂交（fish）探针设计原则和方法

xxp1246087085

谢谢大家，这两天忙考试了，没上网，非常感谢

hn1022

我也要做胚胎的RNA FISH ，想请教一下protocol呀！谢谢

l19rna

回复 hn1022 的帖子6 ~( j' |. m* M7 }0 V

: {; A0 L+ O! Q; p8 v+ H& M不同天数的胚胎的ptotocol会有细节上的差别，我做的比较早期，建议参考nature protocol上的文章：
' H, d+ z/ k- y: |2 ]Title：An optimized procedure for whole-mount in situ hybridization on mouse embryos and embryoid bodies9 J% s0 [1 x! Y. L1 @0 g

无心

无心

想了解

icebaby

做ISH，最常用的还是Riboprobe吧？我想FISH也应该是这样的。我最近要做ISH，探针的话想找个公司来做。

doctorrobin

我想请教一下想做一个对照内参探针找什么基因比较好 本人刚接触ish

细胞海洋

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! V3 O9 {" J6 Z  K0 J# e
2 L. m$ k  ~5 H- h建议你发新帖提问

l19rna

回复 doctorrobin 的帖子+ W$ \# C$ h  b8 w% ?1 H: m
9 m4 \# H& E' [& f) j9 T1 H
我一般是用别人已经发表的探针，而且其表达谱是公认的，才用来做阳性对照；
6 x4 ~1 b6 Y/ p9 r) p阴性对照就选择cRNA的互补序列，这个在你的cRNA载体上转录出来就行。

l19rna

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* o) b. {! M% a1 H9 |0 A1 [* w
FISH已经有很多更高效的方法。尤其是做单细胞且定量的FISH。其探针也有很多种，除了传统的，还有50bp长度，19-24bp长度探针，等等