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楼主: yuhaoze
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[请教] 细胞养了2年了,没碰到过这样的情况,大家帮帮忙吧!   [复制链接]

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11楼
发表于 2012-7-20 17:39 |只看该作者
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胰酶没问题的话,那就是细胞的问题,细胞老化了,或者是分化了,都会影响消化的。
+ d6 a6 K! Y5 P( w, z7 d' |
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12楼
发表于 2012-7-21 10:27 |只看该作者
细胞状态不好的时候就会出现这种情况,比如老化,凋亡,或者是受到支原体的污染。
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13楼
发表于 2012-7-21 12:21 |只看该作者
你最好先确定胰酶是否过期失效或配比错误、甚至不同厂家都有可能!再确定陪养基的成分是否有和胰酶冲突的成分,陪养环境是非设定有误!如果都不是外围环境问题,就恭喜你发现稀有样品!
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14楼
发表于 2012-7-21 12:42 |只看该作者
回复 yuhaoze 的帖子: C/ @7 m& q9 Y) j0 M
' j5 Q% d$ |, G
对呀,,没准谁用了你的胰酶,并且还没发回冰箱,结果发现后,偷偷给你放回去了,但是他却没告诉你这个经过。
* I; M: b  o% E1 V# O# r
% v. r) J8 ~) z或者是细胞传代次数太多了,生长状态不行,我之前养的293T或vero,就是细胞状态很差时就会贴的死死的,消化不下来,如果加长消化时间,细胞是下来了,但是大部分都死了
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15楼
发表于 2012-7-21 13:49 |只看该作者
我的作法是:小体积分装(比如10ml), -20℃冻存, 一旦溶解存放4℃,一般一周内用完,从来没有出过问题。
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16楼
发表于 2012-7-25 12:00 |只看该作者
一般是胰酶问题,肿瘤细胞最好养了。
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17楼
发表于 2012-7-25 13:35 |只看该作者
检验胰酶你可以用它消化一下别的细胞看好不好用啊。也有可能是细胞的问题呢,我以前养过MSC,跟你的情况一样,怎么消化都不下来,同实验室的用的都很好,自己消化别的细胞也没问题,我感觉是细胞可能有问题,但一直没找到原因。希望你的问题解决以后我以后也能做个参考!!
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18楼
发表于 2012-7-25 20:25 |只看该作者
回复 小猪快跑 的帖子4 v2 [& ]6 ^% ?; }0 W- p0 \
3 i- S! ~* t; M0 O0 _8 j& u+ _
嗯,谢谢!
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