关于bFGF配制

huangcong1988

买的peprotech的生长因子bFGF，说明书上写的是用5mM Tris，PH7.6 溶，如果想冻存在负20或者负80的话，就加0.1%的BSA。但是我看坛子里面有战友说可以直接用PBS溶或者直接用超纯水溶。还有战友说保存的话直接用0.1%的BSA溶。我想知道能不能先配好BSA，然后将生长因子溶到BSA中（不用Tris 盐酸配），然后分装后冻存，这样可以吗？还有就是BSA浓度一定要0.1%吗？我用0.15%的行不行？
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补充内容 (2012-7-25 09:03):. f2 G! w; ]6 f7 n6 j8 A, S5 m6 g
说明书上写：reconstitute in 5mM Tris ，PH 7.6 。for extended storage， further dilute in a buffer containing 0.1%BSA（or more）。这里，是先要溶解到Tris盐酸，再溶解到BSA中才能冻存是吧？

flydayzhu

BSA加高一点没问题的，主要是增大蛋白浓度防止bFGF变性的~~~一般我们是用PBS+0.1%BSA将其配成10000x的储液然后分装冻存，用的时候就化一个，一般一周左右用完一个~

天枰2012

BSA可以防止bFGF降解，是保护剂。可以像你说的那样

寒山拾得

CF （carrier free）的用PBS+0.1%BSA溶解，) R* F. j; I2 V, O/ P( ~/ Z. i
有的自带carrier（BSA）冻干的，用PBS溶就可以。

huangcong1988

回复 flydayzhu 的帖子1 n1 b, X- N& m7 E# f
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是peprotech的吗？说明书上是写用Tris 盐酸啊，那溶解的时候是不是是不是也应该用Tris 盐酸呢？还有就是直接用配好的BSA（0.1%）溶bFGF呢？

huangcong1988

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) ~" M' R- W4 k: D# K说明书上写：reconstitute in 5mM Tris ，PH 7.6 。for extended storage， further dilute in a buffer containing 0.1%BSA（or more）。这里，是先要溶解到Tris盐酸，再溶解到BSA中才能冻存是吧？

huangcong1988

回复 flydayzhu 的帖子2 Q9 Y3 k- w! d3 _) u
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还有一点就是我BSA是先配好的，如果先用Tris盐酸配bFGF，再把BSA加到bFGF中，那bFGF跟BSA的浓度不是都会减低吗？

huangcong1988

回复 flydayzhu 的帖子$ K* c, Z  {1 W# J- P* T1 o" G

: T8 E, F2 a$ S" K( c说明书上的推荐浓度是0.1~1mg每ml，总共10μg，那么加100μl的buffer就够了？

flydayzhu

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2 O/ z; {& |$ V( o
+ X8 E7 `; A9 z用过peprotech的，也用过其他公司的，个人觉得pH在那的话影响不会特别大，然后一次不要溶太多~~~先配好0.1%BSA再溶解吧~~

flydayzhu

回复 huangcong1988 的帖子, {  f6 m: {/ B2 U* W
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加100ul含0.1%BSA的buffer