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诱导3天
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成骨诱导3天后的照片,再诱导下去到第七天的时候细胞就掉下来了,细胞数变多,并没有见到细胞形态变成鹅卵石样。不知道同志们成骨诱导什么时候能见到形态发生明显的变化了?
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最近刚开始接触MSC,做大鼠MSC成骨分化的时候遇到了麻烦,用2-3代MSC100000个接种到3cm培养皿中,第二天开始诱导(10-8mol/L地塞米松,50ug/ml维生素C,10mmol/Lbeta甘油磷酸钠,10%FBS),每三天换一次液,到了第5-6天细胞长得已经很满,镜下观察没有明显的多边形细胞产生,仍然为长梭状形态。第7天细胞层整个卷起来,脱落下来了。本来打算诱导2-3周做染色的,现在也做不成了。另外,在24孔板(种板密度5*104/孔)里也发生了一样的情况,不知道哪里出了什么问题?6 k/ J' i& b7 t5 K, k( a! d) z
问题可能很弱智,请高手指点。感激不尽!
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