大家养的DC能达到多少的数量

Tevirly

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( L+ I9 d* o: k( E6 M8 v4 @2 L大家好，我想了解一下大家养人的DC可以收获到多少的细胞，感觉本人的养的DC总是比较少，大约80ml血，分离后，养DC到第六天仅有5~16X10^5，是在10cm的培养皿中养的

一米阳光66

大约是5X106次方吧！150ml血

Tevirly

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. c6 S2 g/ W$ H% ?2 h4 U
求方法求方法~~

wagumaxida

Tevirly 发表于 2012-9-7 15:06 " ]0 U  K% `) l  a" N4 N% i
回复 一米阳光66 的帖子- w" s7 _; U4 x) J- C5 D
  \0 z/ t! T1 y* V- s( |
求方法求方法~~

- s/ a- x! S; a. `( V我之前的方案
8 r  {6 ]& j1 A: QDC培养：外周血分离单核细胞后加因子诱导
$ e8 C* L8 g4 g4 x/ @) p5 Q5 wd0：分血，加因子GM-CSF和IL-4，100ng/ml. T1 K& T5 D2 \; Q+ P2 Y) y, @. h+ S
d3：补充因子至全量
. E4 I* c( S7 h+ Z8 h8 [; q" q  Id6：抗原负载
  H; Q) B7 [, m  [d7：刺激DC成熟，100ng/ml的TNF-α，100ng/ml的IL-6和25ng/ml的IL-1β

Tevirly

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# O3 C. k  ]2 A6 V8 u6 i' R3 r0 `
: @; }1 L  j$ g& F6 s好的，谢谢~！

apai2003

外周血中单核细胞比例直接影响树突状细胞的得率，我们一般最终获取的树突状细胞数量大概是PBMC数量的5-10%

莫邪小仙

回复 wagumaxida 的帖子0 ]' l+ j# m( \& b3 w+ J! N  S
/ v$ s% m) s3 W: l
想问下加入IL-6 有没有参考文献？看过一篇文献上说IL-6 能将单核细胞从DC分化成巨噬细胞，这样在培养体系中加入会不会影响DC的数量和状态？

cheeray

1-2  *10的7，差不多每次都是这个数量。。

xiaolizhang87

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5 J6 L! b8 P. P2 L3 U
大概是5-8*10的6次方吧，60ml血~~

Tevirly

回复 cheeray 的帖子5 Q. h& j1 D- e# n1 y% R
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不会吧，这么多？多少毫升血得到的，你是用磁珠分离法吗