大家养的DC能达到多少的数量

Tevirly

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大家好，我想了解一下大家养人的DC可以收获到多少的细胞，感觉本人的养的DC总是比较少，大约80ml血，分离后，养DC到第六天仅有5~16X10^5，是在10cm的培养皿中养的

一米阳光66

大约是5X106次方吧！150ml血

Tevirly

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& g! E' A& Q' [/ U; ~0 w) ?% g: ^  M7 s4 t- S; i- @' }1 A
求方法求方法~~

wagumaxida

Tevirly 发表于 2012-9-7 15:06 * N# Z& [, m; \- F1 c8 y
回复 一米阳光66 的帖子0 F* j  T0 W9 e2 [
+ {9 H, J4 M! Q" \# e7 M3 l
求方法求方法~~

; ^" u9 i. G( e8 Q
我之前的方案
. Q; u6 Y$ p  H/ S* A$ }3 bDC培养：外周血分离单核细胞后加因子诱导
7 T; L% g0 x) Rd0：分血，加因子GM-CSF和IL-4，100ng/ml/ x+ c% U/ p: t$ x
d3：补充因子至全量
7 n* p- H+ x% i9 i3 ?' md6：抗原负载
$ w" y( G; g! \2 Hd7：刺激DC成熟，100ng/ml的TNF-α，100ng/ml的IL-6和25ng/ml的IL-1β

Tevirly

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7 Q" z3 S1 v8 G: c+ w! H( b3 V$ i7 T. S- K
好的，谢谢~！

apai2003

外周血中单核细胞比例直接影响树突状细胞的得率，我们一般最终获取的树突状细胞数量大概是PBMC数量的5-10%

莫邪小仙

回复 wagumaxida 的帖子) O0 s* ]" {* a3 S' Z) R

4 {9 q) H: A( s# F9 U  \. m想问下加入IL-6 有没有参考文献？看过一篇文献上说IL-6 能将单核细胞从DC分化成巨噬细胞，这样在培养体系中加入会不会影响DC的数量和状态？

cheeray

1-2  *10的7，差不多每次都是这个数量。。

xiaolizhang87

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3 e- a  Q0 {: |9 l. n2 T2 z
大概是5-8*10的6次方吧，60ml血~~

Tevirly

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7 }' D( R' Q% b: ]/ [0 c) j* V% u不会吧，这么多？多少毫升血得到的，你是用磁珠分离法吗