大家养的DC能达到多少的数量

Tevirly

% W$ k  i- h5 m) X. W8 j! q' f6 {: C. a0 s, O4 ~" B
大家好，我想了解一下大家养人的DC可以收获到多少的细胞，感觉本人的养的DC总是比较少，大约80ml血，分离后，养DC到第六天仅有5~16X10^5，是在10cm的培养皿中养的

一米阳光66

大约是5X106次方吧！150ml血

Tevirly

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$ E# _4 f/ k4 c. u" T* n2 _4 W
" B0 A0 E" ~7 h9 _求方法求方法~~

wagumaxida

Tevirly 发表于 2012-9-7 15:06 & b6 f% g2 X, e* R) ?" K" |! i/ _, S5 W
回复 一米阳光66 的帖子$ @6 N4 ^) t0 Q% J- K) p
9 R7 ~2 L; j  f* W, F
求方法求方法~~

3 }1 A$ j0 V! h5 g$ N  H
我之前的方案8 P: L, h; v# o+ A1 z6 X2 i
DC培养：外周血分离单核细胞后加因子诱导) {( u1 Y! n: v
d0：分血，加因子GM-CSF和IL-4，100ng/ml" q2 a: F2 ~8 S
d3：补充因子至全量
( t4 b, u6 R: Qd6：抗原负载
. i% ]. T6 v: \1 y3 G2 E2 ld7：刺激DC成熟，100ng/ml的TNF-α，100ng/ml的IL-6和25ng/ml的IL-1β

Tevirly

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6 Q" o+ B; y, y; L
9 E9 O6 p6 J  c0 V1 s7 {, l7 ]" L好的，谢谢~！

apai2003

外周血中单核细胞比例直接影响树突状细胞的得率，我们一般最终获取的树突状细胞数量大概是PBMC数量的5-10%

莫邪小仙

回复 wagumaxida 的帖子& t& g0 Y" d! R+ p4 }

& Z+ o  u: F) z, h$ f想问下加入IL-6 有没有参考文献？看过一篇文献上说IL-6 能将单核细胞从DC分化成巨噬细胞，这样在培养体系中加入会不会影响DC的数量和状态？

cheeray

1-2  *10的7，差不多每次都是这个数量。。

xiaolizhang87

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, y/ m2 w# |& ~5 N' l
" F/ K5 t& B. V大概是5-8*10的6次方吧，60ml血~~

Tevirly

回复 cheeray 的帖子/ T9 v3 |* U  o4 [* t* x$ G# ]

, T8 \& z. L0 ?$ w, [不会吧，这么多？多少毫升血得到的，你是用磁珠分离法吗