怎么将出生后0-3天雌性小鼠的生殖细胞和颗粒细胞分开？

hcluo

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+ d" [4 ~# f9 {: z/ l- B: [8 ^刺破卵巢后，释放的出来的卵丘细胞，然后用透明质酸酶消化5分钟，吸去卵母细胞，剩下的基本都是颗粒细胞了。

chenchunlei

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* ~( p/ ^/ O8 f7 `, C
3 V* {5 Q$ R+ ~( |" H# H这时候的颗粒细胞和卵母细胞直径差不多吧
/ V1 F; _' }2 w: [5 C

chenchunlei

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+ n  x# c7 T1 v6 c% Y. A( @" v也用过胶原酶啊
7 Q; U3 z+ A4 m1 D: ]

aulenuyah

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4 E& x, ?! j; p* a# W" u4 I
5 H& o& O9 k0 V1 H7 D效果也不行吗？) M5 q5 O/ E5 h# V- N0 m6 E
用的什么浓度的？其实最好用的好像是透明质酸酶，专门消化颗粒细胞的

aulenuyah

回复 hcluo 的帖子/ F- G& Z1 E- J( M
. _; C1 j7 w2 M5 g  r" q1 Q
楼主要用的是0-3天的小鼠，那么小的小鼠不会有什么有腔卵泡的发育，所以根本没有卵丘细胞的。不然的话，先超排，然后刺破还是会挺多的

chenchunlei

回复 aulenuyah 的帖子0 ]: l3 Q3 b; F- b! U9 q, m3 D' ~

2 ~3 L) A3 U$ ]9 o# X; x9 Q. E) Z谢谢
: U. h" y4 J1 l& `/ U+ ]

chenchunlei

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  {. l; X3 h4 z" S
% Y! Z) n. H+ I' c, w) Z& A% ?6 s那时候应该Cysts应该刚解聚完吧，应该都处于原始卵泡阶段。

aulenuyah

回复 chenchunlei 的帖子+ l, B& e+ n5 E8 m$ @9 m
& K$ j$ s0 _. T! B# ^! J0 s( R
所以个人觉得如果需要颗粒细胞，只能通过获得原始卵泡或者腔前卵泡的方式获得。这种方法我试验过，获得腔前卵泡之后，在培养液微滴中培养，之后成功迁出颗粒细胞了