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求教:养饲养层的DMEM,用之前应该预热吗? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-9-14 23:02 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
求教:养胚胎干细胞的feeder饲养层的DMEM,用之前应该预热吗?
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沙发
发表于 2012-9-14 23:46 |只看该作者
毫无疑问,必须37℃水浴左右,但最好是放在CO2培养箱中2h以上,以平衡PH(因为DMEM中有NaHCO3)及温度。
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藤椅
发表于 2012-9-15 02:44 |只看该作者
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+ Z, S4 ~7 q* z$ ~6 [* c4 q* ^! Q8 l5 p2 C" o6 u# [; u6 ~
饲养层细胞很好养的,不用特意预热,我们一般用之前室温放置半小时左右就没问题。
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板凳
发表于 2012-9-15 20:01 |只看该作者
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/ n- j2 e  B% U! S/ _/ [
' n3 w$ D( e4 w% R4 l' f* m您自己分feeder么?我分了好几次了,效果都不好啊

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报纸
发表于 2012-9-15 20:02 |只看该作者
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6 @  f7 g7 V- b5 o! h( m
9 Y+ P6 g3 M& x您自己分feeder么?我分了好几次了,效果都不好啊+ G2 D7 H  t4 i8 h
按理说MEF很好养才对啊,但我分了好几次都效果不佳,也不知道问题出在哪里
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发表于 2012-9-15 22:08 |只看该作者
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, T/ c- {+ b6 P) Z- ]0 Z5 i+ H' j: f  t& v8 v7 j
但是我最近发现一个问题,就是培养基刚刚配好时是橘红色的,放一段时间就变成粉红色的了,求解释
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发表于 2012-9-15 22:09 |只看该作者
回复 yahyo 的帖子
' P' D/ z  i, q9 f1 F
# R3 }# P8 G' ~3 G" f, C; Y" s但是我最近发现一个问题,就是培养基刚刚配好时是橘红色的,放一段时间就变成粉红色的了,求解释

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发表于 2012-9-15 22:10 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子
; f  Z: t. i4 l" C1 o- E& J- u* h% j7 P6 c: l8 c$ J# W; p
你的分指的是什么啊?

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发表于 2012-9-15 22:16 |只看该作者
回复 青鸟 的帖子2 |& T% d" d; V2 p# U5 b3 F

1 V. e, e5 u" w$ q, V+ f; ^5 Z由于经常打开盖子' H9 K9 s% P, ?- s8 H% ~
PH发生改变了
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发表于 2012-9-16 07:14 |只看该作者
回复 huangcong1988 的帖子
6 ^& F/ p# y3 l! }
! C/ F5 X; X5 E, s我们买的原代feeder细胞,自己培养2代后丝裂霉素处理。开始也想自己分来着,但因为买不到CF-1小鼠就直接买的原代feeder细胞。
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