Matrigel 配制的问题

小ga

     本人是养iPS的新手，购买的Matrigel 蛋白浓度为9.5mg/ml ，准备用来包被六孔板做分化，不知道应该稀释成多大的浓度？每孔应加多少量？请高手帮忙解答一下吧

momocy

我不知道你的要怎么稀释，但是6孔板每个孔500ul就够了，我们是买BD公司的，30X稀释

linxifeilong

回复 小ga 的帖子9 J2 E0 m& \) n6 R% r& _, }

* j2 b7 e& r' N/ \4 a, F1 m9 t9 e   您好，请问那个蛋白浓度是在哪里可以查呢？是随产品附带的吗，还是网上查询呢？
% w: }$ x+ Y, {1 c1 p4 X   关于稀释，我看BD说明书上说，是根据“Certificate of Analysis” 中的“dilution facotor”来算的。但我找不到“Certificate of Analysis”，请问你的产品中有吗？
4 Z+ o7 ^$ m6 l8 G) _+ n, d7 [7 \( Z   另外，网上还找到一个THOMSON LAB 的说明书，说是 2mg/管分装，用的时候稀释到6ml 培养基中，六孔板每孔1ml，不知真假。

lchanlon

0.5mg of Marigel in 9 ml DMEM/F12, mix well, and then add 1.5 ml to each well of six-well plate. It's good for ips growth
( I' o7 w. x9 V7 N- d! |& a8 s3 c( u' N6 Z$ |
补充内容 (2012-9-22 09:23):+ U  y/ x5 D4 x8 [* X' f8 S- ~
from James A Thomson lab

pingzongyunlan

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+ q  P5 C" ^! j5 r- A/ H- o$ q# R# {5 T$ o, D" U) C
请问稀释用的DMEM/F-12是配置好的培养液还是无血清培养液？可以用opti-MEM代替吗？

lchanlon

回复 pingzongyunlan 的帖子8 ~# n  ?9 n) P% I
9 i  O6 z7 Y( s, G) ~) }" y% n
DMEF/F12 Only

BDFCM

回复 小ga 的帖子* |8 D7 ?. a" V9 a; q7 J
- u* k4 d$ n  b7 R4 l
You can find the dilution factor in this website:
7 y$ B* g4 t* w+ D/ lhttp://regdocs.bd.com/regdocs/searchCOA.do
' g, o- G( y' o% RYou should add Cat.No, Lot.No, then search.# x/ r( C% d: ]% F, c0 h7 K
then you can dilute your matrigel according the manu# M! ~6 C% J% n2 m8 i

小ga

回复 linxifeilong 的帖子$ o2 p$ Q# k* G' o+ A. K  R

% t8 I& g& Q' a; L  O' B4 J& q蛋白浓度是说明书上写的，但是我也没找到Certificate of Analysis

小ga

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3 S5 h9 `. Q: h5 ?$ }6 u* I/ y& h5 S  e& q
你好，我登陆了这个网址，输入目录号和批号，找到了质量证书，但是没找到关于稀释的方案，麻烦再指教一下:)

BDFCM

回复 小ga 的帖子0 |" g2 c4 Q6 c) P. Q5 k
6 Q) }4 P/ @7 n5 S. N+ b, J
给你个文件，是从354277网页上找到的，里面有详细的操作步骤，希望你实验顺利i