Matrigel 配制的问题

小ga

     本人是养iPS的新手，购买的Matrigel 蛋白浓度为9.5mg/ml ，准备用来包被六孔板做分化，不知道应该稀释成多大的浓度？每孔应加多少量？请高手帮忙解答一下吧

momocy

我不知道你的要怎么稀释，但是6孔板每个孔500ul就够了，我们是买BD公司的，30X稀释

linxifeilong

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+ l* K  |, d" V6 f6 Z( @; d) M' T8 X: ^" _
   您好，请问那个蛋白浓度是在哪里可以查呢？是随产品附带的吗，还是网上查询呢？0 N7 _0 W' X- ?  z4 R" g5 U
   关于稀释，我看BD说明书上说，是根据“Certificate of Analysis” 中的“dilution facotor”来算的。但我找不到“Certificate of Analysis”，请问你的产品中有吗？0 M3 c& R+ I  @
   另外，网上还找到一个THOMSON LAB 的说明书，说是 2mg/管分装，用的时候稀释到6ml 培养基中，六孔板每孔1ml，不知真假。

lchanlon

0.5mg of Marigel in 9 ml DMEM/F12, mix well, and then add 1.5 ml to each well of six-well plate. It's good for ips growth
( ~) {/ a% q) k' M9 A; }: h1 m* d  k% j2 S% @
补充内容 (2012-9-22 09:23):: F3 j  K3 |, i4 K
from James A Thomson lab

pingzongyunlan

回复 lchanlon 的帖子- X% s/ F6 I  L+ `; ~
+ [( k4 g* e3 \" a* R' U+ I
请问稀释用的DMEM/F-12是配置好的培养液还是无血清培养液？可以用opti-MEM代替吗？

lchanlon

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+ U. r7 B4 s( t$ t+ l0 r) j0 C+ R+ S$ {+ t4 E
DMEF/F12 Only

BDFCM

回复 小ga 的帖子+ s) V9 b" r2 G& \1 O$ {' B7 `

- ^- A3 j5 G- ~! gYou can find the dilution factor in this website:
/ d) K& |7 e; khttp://regdocs.bd.com/regdocs/searchCOA.do
2 F9 T( R0 I& K% g. v0 yYou should add Cat.No, Lot.No, then search.6 Q, D# r+ m# ?  _
then you can dilute your matrigel according the manu; j! `2 p8 w# J2 S

小ga

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0 }" {) o% J, U* O* h8 H+ J, t& Y7 N% ]! r4 K
蛋白浓度是说明书上写的，但是我也没找到Certificate of Analysis

小ga

回复 BDFCM 的帖子# A  U1 y8 J; s/ s2 f

) H2 m/ j2 f" Q你好，我登陆了这个网址，输入目录号和批号，找到了质量证书，但是没找到关于稀释的方案，麻烦再指教一下:)

BDFCM

回复 小ga 的帖子6 z; U  ^( b3 _- h: C
5 S2 ?8 E* ~! H& b% x% @
给你个文件，是从354277网页上找到的，里面有详细的操作步骤，希望你实验顺利i