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楼主: 第一心音
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求高人指点慢病毒浓缩和保存的问题 [复制链接]

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发表于 2012-12-5 14:19 |只看该作者
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# ^! {) R" \! I9 _5 ?
+ V. ]' N4 ^3 A8 @$ c" O具体的我们也不清楚,只知道拿去那家公司辐照,几天后再拿回来,貌似是gamma射线呢(不确定)。至于为什么要高速离心,因millipore的15ml离心管你能收集到的病毒原液很多,应该至少3-4ml.我们如果用来打动物的时候这么大体积的病毒量会带来很多麻烦,如果你做细胞的话没有问题,可以不用高速离心。再说了,超速离心后蛋白还是很多的,因此我们添加有20%蔗糖除蛋白,25000rpm离心2小时后过夜溶解病毒第二天分装并测定滴度
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发表于 2012-12-6 10:09 |只看该作者
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' d9 M& b+ D! U$ ?- G' U
0 u# P3 X- A+ h: _9 T$ K) I3 [非常感谢,我用来感染细胞的,那么就是说4000g离心20min以后就可以直接用于感染细胞了吗?
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发表于 2012-12-6 10:10 |只看该作者
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3 F6 W; V& F- \7 i# a2 O) L' k% x8 j
不辐照呢?辐照是消毒吗?还是杀菌呢?把外面用酒精棉擦拭干净不行吗?
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发表于 2012-12-6 14:44 |只看该作者
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) ^) @+ m! |# o
' o$ \+ x  c6 J: N7 W& J$ Q3 n这个我不太清楚哈,如果直接感染细胞的话可以用了,我们实验室有这样做的,效果也不错。
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