关于matrigel的问题

bubble_w

我铺的matrigel是1:20稀释的，铺完之后在镜下观察，会看到很多纤维还有类似杂质的黑色斑点，请问各位战友有否遇到相同情况。事先说明一下，溶胶、配置等过程完全按照操作手册，冰上操作，所有耗材预冷。

pailishi

应该没有

shuishan

偶尔看到黑色斑点，但是不影响细胞贴壁生长。2 T) G9 `+ ]0 V2 |  D3 |

开心果王

不知道你说的是不是类似于纤维样的物质，matrigel铺完后会有一层薄纱样的物质包被在板子表面上，比较均匀，操作不当会形成大块的胶聚集物，肉眼都可见。如果你都是按说明书来的话，应该是正常现象。

chentian820

这是很正常的，我的也是这样，hESC在长得没有任何问题。

bubble_w

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$ |  k" k5 e  k$ k6 W4 W% c( R4 R! n3 b$ P2 H' |$ @% S
我直接把hESC复苏在上面，用的是mTeSR1，干细胞复苏48h后基本没怎么贴啊。

bubble_w

回复 shuishan 的帖子" n- N* C# F, c- S& I* o
  X0 {9 w$ V2 O# K2 V* l9 {, \3 }
feeder cell复苏在上面感觉有点皱缩，不知道是不是有影响。

bubble_w

再问个问题。matrigel最多可以多少比例稀释？1:50？

也行天下

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6 k: N6 q9 M# S* Z  h- F* s3 o  g3 J& m- O- j
我们养hiPS细胞，matrigel1:80稀释，细胞贴壁和生长都没有问题。
& X- W. g$ \, ~3 g# X稀释Matrigel胶的时候，除了按操作手册操作以外，还要注意速度要快。

chentian820

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- L& X. F9 R# w( s+ W- K7 u5 E# O% S) p0 ?) j! a
你的干细胞种子不好，一般复苏效率在10%左右。可能你的就没活的种子