关于matrigel的问题

bubble_w

我铺的matrigel是1:20稀释的，铺完之后在镜下观察，会看到很多纤维还有类似杂质的黑色斑点，请问各位战友有否遇到相同情况。事先说明一下，溶胶、配置等过程完全按照操作手册，冰上操作，所有耗材预冷。

pailishi

应该没有

shuishan

偶尔看到黑色斑点，但是不影响细胞贴壁生长。9 {7 k9 w  u' k

开心果王

不知道你说的是不是类似于纤维样的物质，matrigel铺完后会有一层薄纱样的物质包被在板子表面上，比较均匀，操作不当会形成大块的胶聚集物，肉眼都可见。如果你都是按说明书来的话，应该是正常现象。

chentian820

这是很正常的，我的也是这样，hESC在长得没有任何问题。

bubble_w

回复 chentian820 的帖子" Q( S8 u+ R2 q4 q. d7 }

& o+ @9 w# @' g9 K" i" C我直接把hESC复苏在上面，用的是mTeSR1，干细胞复苏48h后基本没怎么贴啊。

bubble_w

回复 shuishan 的帖子5 p# z6 ?  I0 \% D9 Q" Z

; @2 b  v5 J; \6 N& Ffeeder cell复苏在上面感觉有点皱缩，不知道是不是有影响。

bubble_w

再问个问题。matrigel最多可以多少比例稀释？1:50？

也行天下

回复 bubble_w 的帖子1 a1 _! N/ H  m

; i" v/ I5 h9 ]7 h$ e5 P我们养hiPS细胞，matrigel1:80稀释，细胞贴壁和生长都没有问题。
  e) S+ D, |0 u2 J8 P5 p' [稀释Matrigel胶的时候，除了按操作手册操作以外，还要注意速度要快。

chentian820

回复 bubble_w 的帖子
, e  P  ?; F7 j2 g. T* k4 T: ?6 D0 S9 T- w( M' ^0 i0 y
你的干细胞种子不好，一般复苏效率在10%左右。可能你的就没活的种子