MSC这种状态如何预防及处理

wbs1986

最近养人骨髓MSC，原代形态还可以，第一及第二代就出现很多黑色颗粒，然后细胞过几天就死了，不知道是不是传说中的黑胶虫。出现这种情况应该怎么处理，如果只能丢弃的话，那这种应该怎么预防，最近已经连续出现四五批了。无菌操作应该没什么问题，培养液用的是低糖DMEM加10%GIBCO胎牛血清和1%双抗，请各位大神多提建议。

xiaocell

不知道是不是黑胶虫，但是细胞似得较多的话也会分泌这种物质

cartoonyang

除了双抗，再加上第三种抗生素吧。

huajie881026

明显是老化，老化的细胞贴壁性减退，细胞内很多黑色颗粒，注意胰酶消化时间、浓度！

na6021023

细胞间很不清晰啊，不排除污染。

lql2006wh

你们实验室内同样血清养的其他细胞有没有这种现象？! e" r7 B7 I& ^& c
我做脐带、胎盘MSCs，P0背景会比较脏，到P1可能还会有些渣滓、碎片之类的，但是一般都很少了。
) a" U" c. l/ N  |图片上看着细胞状态、形态都有点那什么了

caiyu07248

我发现我原代培养的时候也有很多这种脏脏的东西，不知道是什么，但是慢慢换液后，传代后就好了，不过我加了预防支原体的抗生素，不知道是不是这个原因。

sdyinong

感觉细胞可能老化，是不是传代时细胞数目太少了，

安lisha

回复 sdyinong 的帖子2 R- }! b) G* M! t
0 S$ o8 |7 }* g" v0 z
麻烦问一下T75的培养瓶传代时合适的细胞数目是多少呀？

lovesxj941

我建议还是从空培养开始，检查一下培养基，还有建议让大家看一下原代照片，好有个比较。如果本身接种细胞浓度很低的话，很有可能成为这个样子。