求助：慢病毒感染间充质干细胞

songyang1987

最近在做用慢病毒plvx-RFP（clontech）感染间充质干细胞，慢病毒是用 Lenti-X™ HTX Packaging System （clontech）试剂盒包装的，包装效果还不错，但是感染效果不好，也加了polybrene（10ug/ml），但是最近做的都没有感染效果，之前做过几次，虽说感染效果不佳，但是也会有一些红色荧光，最近做的是一点荧光都没有啊！ 6 T: h0 m; r' N: A
希望有做过的能分享一下经验哈！非常感谢哈！

希望之光

干细胞一般都不容易感染，建议多试试几个条件

zmm10

回复 songyang1987 的帖子- V2 _7 _. v9 @9 A% x
' n9 l6 x6 c- i' P5 S
多试几个病毒梯度。还有就是感染时培养基中不要加双抗。

quge_00

回复 songyang1987 的帖子4 |+ T% z% u, ^& t

" N2 P$ r4 ^3 N7 C有人做的是多次感染才成功的，文献的是一次就成功的。。。不知道是不是细胞异质性和病毒不同造成的。我做的也是按文献来，转一次，也转不上。。。听师兄说可以连转3次，可以提高效率。我也正在试，期待有好结果~~~另外，楼主你转染是按MOI值来还是不同稀释低度的呢？

ditiger

先摸一下MOI值，公司给的参考一般不适用于MSCs。